鹿茸中促肾上皮细胞增殖蛋白的分离纯化与表征.pdfVIP

第35卷第l期 福州大学学报(自然科学版) v01．35No．1 2Q堕生2旦 鹿茸中促肾上皮细胞增殖蛋白的分离纯化与表征 谢云，张晨，郭春腾，饶平凡 (福州大学生物工程研究所，福建福州350002) 摘要：采用凝胶过滤层析以及离子交换色谱方法，从鹿茸中纯化出一种蛋白，其在SDS—PAGE电泳上显示 为一条带，分子质量为53．3kDa，同时初步考察了该纯化蛋白在6种不同浓度下对狗肾上皮细胞(MDCK) 增殖的影响．结果发现，该蛋白在O．124 mg／mL浓度时，MDcK细胞的增殖效果最佳，达73．02％． 关键词：鹿茸；蛋白；肾上皮细胞；纯化；表征 中图分类号：Q512．1 文献标识码：A I．Ildficationandchan蛇terizationofa ftom pmteinpno∞aIluer andits e仃ectson pmUfemtiVeMDCK∞lls ⅪEYun，ZHANGChen，GUOChun—teng，RAOPing一￡帆 of (IrIs石tute aIlder wasex妇cted舳d chro— Abs昀ct：ne pilose pIDtein purifiedbygelfil吼don，ionexch明ge showsa bandin tllemolecularis53．3kDa． mat0鲫hy，whichsinde SDS—PAGE，and weight anicle This dIeeⅡ-ectofthe si】【d迁ferent al∞investi朗led purifiedpmteiIl(试dl c趴ine tllat由is coIlldincreasetlle Madin—DarbykidIleyc邑Us(MDCK)iIl、，ihD。It南毗ldprotein ofMDCK 0．124 prol如mtion ceⅡs。especiaⅡy73．02％at m只／mL． c肌ine KIlywords：pilo∞allder；pIotein；Madin—DarbykidIley 鹿茸取之于梅花鹿或马鹿年生角的未完全骨化的幼角，为盛誉国内外的常用名贵滋补品和中药材． 鹿茸是所有哺乳动物中生长最迅速的可再生器官，在90 d内迅速生长骨、血管、神经、表皮、毛发等俱 全的综合器官．由此可见，鹿茸中富含调控上述各器官组织发育成长的各类细胞生长因子‘l’21．对鹿茸 中的细胞生长因子进行研究是揭开鹿茸功效奥秘的一把钥匙．本试验通过凝胶过滤层析以及离子交换 色谱等分离方法，从鹿茸中分离出一种具有促进狗肾上皮细胞(MDCK)增殖的蛋白，并对其进行初步 表征，这可能为阐述鹿茸的生理功效提供物质基础，还有可能为进一步开发鹿茸中高活性药物提供实 验依据． ． 1材料与方法 1．1药品与试剂、 带血冻干鹿茸由美国德州大学胜安东尼奥健康科学中心霍玉书教授提供；狗肾上皮细胞株(MD— 一二甲基噻唑一2)一2，5二苯基一四唑氢溴酸盐(MTT)与胰蛋白酶购自美国AMRESCO公