T-RFLP技术在厌氧氨氧化菌群结构分析中应用.PDFVIP

第４５卷　第２期 哈　尔　滨　工　业　大　学　学　报 Ｖｏｌ４５ Ｎｏ２ 　 　 ２０１３年２月 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＨＡＲＢＩＮＩＮＳＴＩＴＵＴＥＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ Ｆｅｂ．２０１３ 　　　　　　 Ｔ－ＲＦＬＰ技术在厌氧氨氧化菌群结构分析中的应用 储昭瑞，李相昆，孟令威，张　杰 （哈尔滨工业大学 城市水资源与水环境国家重点实验室，１５００９０哈尔滨） 摘　要：为实现对样品中厌氧氨氧化菌群落组成的快速分析，提出一种基于末端限制性片段长度多态性技术（Ｔ－ ＲＦＬＰ）分析环境样品中厌氧氨氧化菌群结构的方法．通过对ＳＩＬＶＡ（Ｒ１０８）ＳＳＵＲｅｆ数据库中已知厌氧氨氧化菌１６ＳｒＤ ＮＡ序列的模拟ＰＣＲ和酶切分析，选取合适的ＰＣＲ引物（Ａｍｘ３６８ｆ－Ａｍｘ８２０ｒ）和限制性内切酶（ＭｓｐＩ和ＲｓａＩ），使得不同 厌氧氨氧化菌属对应不同末端片段长度（Ｔ－ＲＦｓ），从而完成对厌氧氨氧