第六章 球菌.ppt

第六章 球菌 球菌引起化脓性感染，故又称化脓性球 菌。本章介绍临床最常见的兼性厌氧球 菌、即葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌 属、奈瑟菌属和布兰汉菌属。 第一节 葡萄球菌属 一、分 类 重要菌种有金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌， 头状葡萄球菌，人葡萄球菌和腐生葡萄球菌。 人体分离的葡萄球菌还有溶血葡萄球菌、沃氏 葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施 氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔 氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、 山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌和中间葡萄球菌。 二、临床意义 凝固酶阳性葡萄球菌是重要致病菌，以急性 化脓性感染为特征，感染还可扩散或转移。 常见的感染有疖痈、切口创伤等局部感染和 骨髓炎等全身性感染。致病性与侵袭性酶类 (如血浆凝固酶)和多种毒素有关。某些菌株 还能产生肠毒素引起食物中毒；产生剥脱毒 素可引起人类烫伤样皮肤综合征；产生毒性 休克综合征毒素引起毒性休克综合征(TSS)。 凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘膜 正常菌群，是医院感染的主要病原菌， 其中表皮葡萄球菌引起人工瓣膜性心 内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性 腹膜炎、血管移植物感染和人工关节 感染等；腐生葡萄球菌则是女性尿路 感染的重要病原菌，成为重要的条件 致病菌和免疫受损患者的感染菌。 感染的发生常和细菌产生夹膜多糖或糖 萼有关，它能增强细菌与生物性瓣膜、 导管等物质表面的粘附或在其表面形成 一层生物膜而保护细菌对抗杀菌物质作 用。葡萄球菌的耐药性已演变为医院感 染和临床治疗的棘手问题。 三、微生物特性 直径0.5～1.5μm、革兰阳性球菌， 排列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞。 能形成荚膜。 兼性厌氧菌，营养要求不高，最适生长温 度35℃～37℃，最适 pH7.4～7.6。普通培 养基上形成2～3mm呈金黄色、白色、柠檬 色等不透明圆形凸起菌落，血琼脂平板上 有透明溶血环。能在10％～15％NaCl琼脂 中生长，接种于高盐琼脂平板上，有利于 菌种检出。 抵抗力最强，耐干燥，对多种抗生素和 消毒剂不敏感。生化反应活泼、能分解 多种糖类和蛋白质，触酶阳性。G+Cmol％ 为30～39，携带青霉素酶和乙酰基转移 酶的质粒，能通过转导转移耐药性。 四、微生物检验 （一） 采取标本应避免正常菌群污染。 （二） 直接显微镜检查 无菌体液如脑脊液和关节穿刺液涂片革 兰染色，查见细菌具有重要临床价值； 其他体液标本如同时伴有炎性细胞也 具有参考价值，可向临床初步报告“查 见属革兰阳性葡萄球菌”。 其他体液标本如同时伴有炎性细 胞也具有参考价值，可向临床初 步报告“查见属革兰阳性葡萄球菌”。 （三）分离培养与鉴定 临床标本可接种血平板，污 染标本接种在选择平板上，如甘 露醇高盐平板，血液标本则用肉 汤增菌培养基。 孵育过夜平板上可见直径约为2-3mm， 呈金黄色、白色或柠檬色的光滑、不 透明、凸起圆形菌落，有时可见β- 溶血环，挑取菌落作鉴定试验。 鉴定病原性葡萄球菌的方法 1．凝固酶试验 试验所用的血浆为 EDTA抗凝兔血浆。金黄色葡萄球 菌、中间型葡萄球菌呈现阳性反 应。 (1)玻片凝固酶试验：金黄色葡萄 球菌表面有结合的凝固酶(聚集 因子)，与血浆中的纤维蛋白原 交联使菌体快速凝聚。 (2)试管凝固酶试验：细菌分泌到 菌体外的凝固酶被血浆中的协 同因子激活形成复合物，再使 纤维蛋白原转变成纤维蛋白。 2.耐热核酸酶试验 大多数金 黄色葡萄球菌、施氏葡萄球 菌、中间葡萄球菌、猪葡萄 球菌能产生耐热核酸酶。 将待测菌的过夜肉汤培养物置沸 水浴15min后，滴加于含甲苯胺蓝 核酸琼脂上已打好的直径为2～5mm 小孔内，置35％孵育，1h后观察 结果，绕孔周围蓝色琼脂转变为 粉红环为阳性。 大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡 萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄 球菌和猪葡萄球菌为阳性。 将待测菌种点种在加有硝基酚 磷酸盐的pH5.6～6.8MH琼脂上， 孵育18～24h，菌落周围出现黄 色为阳性。 溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、 施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为 试验阳性。 将孵育24h斜面培养物接种在含 吡咯烷酮-β萘基酰胺肉汤中,35℃ 孵育2h，加入试剂后2分钟内呈现 深紫红色为阳性。 (四)药物敏感性试验