药物的鉴别试验.ppt

药物的鉴别试验 药物的杂质检查 药物定量分析与分析方法验证 （3）药物鉴别通常选用综合分析试验法，用化学鉴别法、仪器分析法、生物检定法等不同方法鉴别同一种供试品，综合做出判断。一般每种药品选用2～4种方法进行鉴别试验，相互取长补短。 药物鉴别采用的方法应是专属性强，重现性好，灵敏度高，并且简单可行、快速。常用的方法有化学法、紫外吸收光谱法、薄层色谱法、红外吸收光谱法等多种方法，下面主要介绍几种常用的鉴别方法。 1、特点：化学鉴别法操作简便、快速、实验成本低，是药物鉴别时最常用的方法。 2、鉴别依据：根据药物与化学试剂在一定条件下发生离子反应或官能团反应产生不同颜色，生成不同沉淀，放出不同气体，呈现不同荧光，从而做出定性分析结论。 （1）干法　 干法系指将供试品加适当试剂在规定的温度条件下（一般是高温）进行试验，观测此时所发生的特异现象。 常用的方法有焰色试验和加热分解试验。 焰色试验：利用某些元素所具有的特异焰色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。 方法为：取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。 例如：钠为鲜黄色，钾为紫色。 在临床使用的青霉素类及头孢菌素类药物大多为其钠盐或钾盐，鉴别时利用钠、钾盐的焰色反应。 加热分解：在适当的温度条件下，加热使供试品分解，生成有特殊气味的气体。 例如：舒林酸的加热分解（取本品约15mg,置试管中,小火加热数分钟），产生刺激性的二氧化硫气体,并能使湿润的碘-淀粉试纸蓝色消褪。 （2）湿法 湿法系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条件下进行反应，发生易于观测的化学变化，如颜色、沉淀、气体、荧光等。 呈色反应鉴别法： 系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。 常用的反应类型有： ① 三氯化铁呈色反应—— 酚羟基或水解后产生酚羟； ② 异羟肟酸铁反应—— 多为芳酸及其酯类、酰胺类； ③ 茚三酮呈色反应—— 氨基酸及氨基糖苷类； ④ 重氮-偶合显色反应—— 芳伯氨基或能产生芳伯氨基； ⑤ 氧化还原显色反应及其他颜色反应。 荧光反应鉴别法： 常用的荧光发射形式有 ①药物本身可在可见光下发射荧光； ②药物溶液加硫酸使呈酸性后，可见光下发射荧光； ③药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光； ④药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其他反应后，发射荧光。 气体生成反应鉴别法 ①大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气； ②化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体（硫喷妥）； ③含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气； ④含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。 （2）测定吸收系数。 药品在一定波长下的吸收系数，可用于药品的鉴别。 例如：甲砜霉素，取本品精密称定，加水溶解并定量稀释成浓度为200?g/ml的溶液，依法测定，在266nm和276nm处有最大吸收，吸收系数分别为25～28和21.5～23.5；取上述供试品溶液1ml，加水稀释成20ml后，在224nm处有最大吸收，吸收系数为370～400。 （3）对比吸收度或吸收系数的比值。 取不同吸收峰或吸收谷处的吸收度的比值作为鉴别的依据。由于溶液浓度和吸收池厚度均相同，因此用此法可消除浓度和厚度的影响。 例如:维生素B12的鉴别，《中国药典》（2010年版）规定361nm处的吸收度与278nm处的吸收度比值应为1.70～1.88，361nm处的吸收度与550nm处的吸收度比值应为3.15～3.45。 （4）对比吸收光谱的一致性。 用上述几种方法鉴别时，无法发现吸收曲线其他部分的差异。必要时可将浓度相同的试样与标准品在同一条件下分别扫描其吸收光谱，对比其一致性；也可利用文献中的标准图谱对照。 特点：红外吸收光谱法（IR）是一种专属性很强、应用广泛（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。 作用：主要用于组成单一、结构明确的原料药鉴别，特别是结构复杂、用化学方法不易鉴别的药物。 鉴别方法：采用标准图谱对比法，即在药典规定的条件下测定供试品的图谱，然后与《药品红外光谱集》对照。 对照时一般先看最强峰的吸收位置、形状、数目等是否一致，然后再检查中等强度缝和弱吸收峰是否对应，如果供试品的红外光吸收图谱与对照品的图谱完全一致，一般可认为是同一种化合物。 为了确保鉴别结果准确无误，药典一般不单独用本法进行鉴别，常与其他理化方法联合进行鉴别。 如：《中国药典》（2010年版）二部苯酚鉴别项下规定：取本品0.1g，加水10ml溶解后，照下述方法试验。 （1）取溶液5ml，