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糕点中四种人工合成着色剂测定 　　摘 要：采用高效液相色谱仪对糕点中四种人工合成着色剂（柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄）进行测定。该方法科学、准确，分离快速，可用于糕点中四种人工合成着色剂的检测 关键词：糕点；柠檬黄；苋菜红；胭脂红；日落黄；液相色谱 中图分类号： TS251 文献标识码： A 文章编号： 1673-1069（2017）05-183-2 0 引言 糕点是目前市场上最为常见的一类小吃，因种类繁多，口味多元，而受到人们的广泛喜爱。根据国家标准GB/T 20977-2007 《糕点通则》，糕点可按加工方式分为热加工糕点和冷加工糕点两大类，其中，热加工糕点占主导，其因产品制作工艺和本身特色的不同又可分为五大类：烘烤糕点、油炸糕点、水蒸糕点、熟粉糕点和其他类。蛋糕、水晶饼、麻花等就是糕点大类中的一部分。然而，许多不法商家为了提升糕点的色泽，纷纷往糕点中违规添加合成着色剂，合成着色剂没有营养价值，长期过量食用会对身体健康产生一定影响[1] 食品中合成着色剂的测定方法目前已知的有：示波极谱法[2]、分光光度法[3]、液相色谱串联质谱法[4]、高效液相色谱法[5]等。其中，高效液相色谱法因定性定量准确而应用最为普遍，国家标准GB 5009.35-2016《食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》采用此法，但是标准适用范围为：饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品，糕点并未在其列。本文拟建立糕点中四种人工合成着色剂的液相色谱测定法 1 仪器与试剂 1.1 仪器 岛津LC-20液相色谱仪（二元泵，柱温箱，自动进样器，二极管阵列检测器SPD-M20A），分析天平（CPA224S，德国赛多利斯），纯水器（AWL-1002-M，台湾艾科浦）；组织捣碎匀浆机（JJ-2（2003-61），常州国华电器有限公司 ）；离心机（LD4-2A，北京医用离心机厂）；超声波清洗器（KQ-500E，昆山市超声仪器有限公司）；漩涡混合器（VORTEX 3，德国IKA） 1.2 试剂 超纯水由艾科浦纯水器制备（再经0.45μm滤膜过滤），甲醇（色谱纯，阿拉丁试剂）；乙酸铵（优级纯，国药集团）；石油醚（分析纯，沸程30～60℃， 国药集团）；乙醚（分析纯，国药集团）；氯化钠（分析纯，国药集团）；乙酸锌（分析纯，国药集团）；亚铁氰化钾（分析纯，国药集团）；冰醋酸（分析纯，国药集团）；柠檬黄标准物质：GBW（E）100158，苋菜红标准物质：GBW（E）100160，胭脂红标准物质：GBW（E）100161，日落黄标准物质：GBW（E）100159，均?于中国计量科学研究院 2 方法与条件 2.1 工作溶液的配制 2.1.1 标准工作溶液 用刻度移液管准确吸取柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄标准溶液于棕色容量瓶中，分别加超纯水稀释定容配成0.5ug/mL，1ug/mL，2ug/mL， 5ug/mL，10ug/mL的混合标准溶液系列 2.1.2 其他工作溶液 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，用纯水溶解并定容至100mL，此溶液的浓度为106g/L。乙酸锌溶液：称取110.0g乙酸锌，加15mL冰醋酸溶解，再加水定容至100mL， 此溶液的浓度为220g/L 2.2 色谱条件 色谱柱为Waters C18柱（4.6mm×250mm， 5μm）； 柱温30℃； 流动相为甲醇+0.02mol/L乙酸铵溶液；梯度洗脱：15%～35%，4%/min；35%～80%，4.5%/min；流速为1.000mL/min；进样量为20μL；测定波长：254nm 2.3 样品预处理 样品经组织捣碎匀浆机搅拌捣碎，精密称取5g样品于50mL离心管中，处理步骤如下： ①油脂高的糕点（如麻花）：加入30mL石油醚和乙醚（1：1）混合液，漩涡混合器混匀2min， 超声提取20min，过滤，除去滤液，加入30mL饱和氯化钠溶液，超声提取15min ②蛋白质高的糕点（如蛋糕）：先后加入5mL亚铁氰化钾和5mL乙酸锌溶液，漩涡混合器混匀2min， 超声提取20min，静置30min，然后加入30mL饱和氯化钠溶液，超声提取15min，再加入10mL甲醇 ③其他：加入30mL饱和氯化钠溶液，超声提取15min。再加入10mL甲醇，4000r/min离心5分钟，取上清液经0.45μm滤膜过滤后上机分析 3 结果与讨论 3.1 工作曲线和最低检出限 按2.2色谱条件对合成着色剂进行分析，色谱图见图1，这四种合成着色剂在2.2色谱条件下能快速分离（11min内均已出峰），且峰形较好，分离效果明显。以Y代表合成着色剂的浓度，单位为ug/mL，X表示色