CDK4、P16在中耳胆脂瘤中的表达及意义论文.docVIP

　　CDK4、P16在中耳胆脂瘤中的表达及意义论文 【摘要】 观察细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子P16在中耳胆脂瘤上皮的表达情况，探讨它们在胆脂瘤发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学技术SABC法检测CDK4、P16在中耳胆脂瘤35例、正常外耳道皮肤20例中的表达，并结合胆脂瘤对听小骨骨质破坏程度，采用SPSS11.5软件进行统计学分析。结果：CDK4、P16均表达于胆脂瘤上皮的棘细胞层、颗粒层和角质层，阳性率分别为68.6%、88.6%，高于对照组(前者P=0.011,后者P=0.02)。二者在胆脂瘤上皮的表达有一定的相关性，P＜0.05;与中耳胆脂瘤听小骨骨质破坏程度之间无明显相关性，P＞0.05。结论：CDK4与P16在中耳胆脂瘤发生中是共同而非单独起作用的.freelan middle ear cholesteatoma and to explore their roles in the development of cholesteatoma. Methods: Thirtyfive cholesteatomas tissues and tal human external ear canal skin ens munohistochemical SABC method to detect the expression of CDK4 and P16. Correlations betainly in the prickle and granular layers of cholesteatoma epithelium. Their positive rates al external ear canal epithelium and the cholesteatoma epithelium（P=0.011, P=0.02）, and a positive correlation beta group(P＜0.05). The statistical results indicated that the expression of CDK4 and P16 did not related to the extent of ossicular damage in cholesteatoma(P＞0.05). Conclusion： CDK4 and P16 are overexpressed in human middle ear cholesteatoma epithelium and positively correlate ent of cholesteatoma. The cholesteatoma epithelium has a hyperproliferation ability and a mechanism of inhibiting the proliferation. The result of immunohistochemical examination is not related to the degree of ossicular destruction. ［KEY 柠檬酸高温高压抗原修复，自然冷却后蒸馏水洗2次×3?min，PBS洗2次×3?min；滴加抗原修复液Ⅰ10?min PBS洗3次×3?min；滴加正常山羊血清封闭液20?min甩去多余液体，不洗；滴加稀释后的一抗（CDK4及P16稀释倍数均为1∶200），4?℃过夜；PBS洗3次×3?min；滴加生物素化山羊抗兔IgG，20?℃20?min后PBS洗3次×3?min；滴加SABC，20?℃20?min PBS洗4次×5?min；DAB（3，3′二氨基联苯胺4盐酸）室温下显色，镜下控制反应时间；蒸馏水洗涤，苏木素复染，脱水，透明，中性树胶封固，显微镜观察。 1.4 结果判断 细胞不着色，或呈浅棕色的背景颜色为阴性表达。细胞内棕黄色或褐色颗粒为阳性表达。于400倍视野下随机选取5个不相重叠的着色视野进行观测，参照shimizu改良法［7］进行结果判定及评分：（1）显色程度：基本不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；（2）显色数量：无阳性细胞为0分，阳性细胞占计数细胞总数比例小于1/3为1分，1/3 2/3为2分，2/3以上为3分。结合显色程度及数量进行综合判断，计算二者相加得分，取平均值，小于3分为（-，阴性），3分为（+，弱阳性），4分为（，中等阳性），5 分为（），6分为（），及为强阳性。 1.5 统计学处理 采用SPSS11.5版软件包进行分析。组间阳性率及表达强度的比较采用Chisquare Test，必要时用Fisher精确概率法。两两指标间