【2017年整理】组织切片制作.pptVIP

组织切片技术 ;概述;石蜡切片技术 ;一、取 材 取材应注意事项： 切取组织应根据需要观察的部位进行选择。 所取组织应包括脏器或组织的重要结构或全层，同时考虑好切面方向。 病理组织除切取病变部位外，还要切取病变和正常组织交界区域，以利观察分析。 切取的组织必须新鲜。 取材后立即投入固定液中，否则组织会收缩变形，发生自溶现象。; 3 切取组织，刀要锋利，动作要轻，不可来回切割，也不要挤压或牵拉组织，以免组织变形或内部细胞结构受损伤而发生变化。 4 切取的组织块必须小而薄。 组织块的大小一般为0.5×0.5×0.2cm、1×1×0.3cm或1.5×1.5×0.3~0.5cm，最厚不能超过0.5cm。 另：柔嫩组织、被膜厚而坚实的器官、小动物的器官及组织 5 采取消化道组织时应保持清洁。 ;6 防止材料因固定剂的作用而发生变形。 如：柔嫩、薄的材料，有空气的组织 7、组织块附加标记的方法 采取的不同组织块，必须根据切片的要求和需要分瓶放入进行固定，加标签以示区别，并注明固定液、名称、来源、日期等等。 ; 二、固 定 固定就是将采取的新鲜组织，放入固定液内，借助化学药品的作用使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成份沉淀保存下来。同时，使组织硬化不变形，有利于固定以后的处理。; 固定时间 应根据组织的种类、性质、大小，固定液的种类、性质、渗透力的强弱而定。 如：一般组织，以10％福尔马林固定24h左右，波音(Bouin)氏固定液12至24h，卡诺氏(Carnoy)固定液1h内。 适当地增加温度可缩短固定时间。;3 常用固定液 ;酒精固定液： 无水乙醇（纯酒精）85ml（或95ml） 蒸馏水 15ml（或5ml） ;（２）混合固定液 波音(Bouin)氏固定液： 饱和苦味酸水溶液 75ml 甲醛 75ml 冰醋酸 5ml ;中性福尔马林固定液 甲醛 100ml 蒸馏水 900ml 磷酸二氢钠 4g 磷酸氢二钠 6.5g ; 三、 洗 涤（或水洗） 目的：组织在固定后要把渗入里面的固定液洗去，否则留在组织中的固定液有的会妨碍染色，??的会产生沉淀或结晶。 ;四 脱 水 组织经固定和水洗后含多量水分，水与透明剂、石蜡不能溶合，因此，在透明、浸蜡前必须进行脱水，把组织中的水份彻底驱除。;;五 、 透 明 ;六 浸 蜡 组织透明后，放入熔化的石蜡内浸渍，使石蜡渗入组织同时取代组织内的二甲苯，这个过程称浸蜡。 ;七 、 包 埋 ;、切片和附贴 组织经石蜡包埋后制成的蜡块，用切片机切成薄片的过程称切片。 ;2 切片制作过程 ;、烤 片 ;十、 染 色 ;（10）1％盐酸酒精 ;染色结果：细胞核蓝色，细胞浆、肌肉、结缔组织、红细胞等呈不同程度的红色。切片应该是红蓝相映，色彩鲜明。 ;2 苏木精（素）－伊红染色液的配制 ;HE染色、封固后的切片