【2017年整理】12.涤脍十二RNA的生物合成.ppt

RNA的生物合成 （转录） RNA Biosynthesis, Transcription;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;第一节;转录 (transcription)的定义 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 ;复制与转录的比较;相同或相似点： 1.都需要解开DNA双链； 2.都以DNA为模板； 3.聚合过程都为核苷酸之间形成磷酸二酯键； 4. 链的延伸方向都为5’ 3’； 5. 都遵守碱基配对规律;复制和转录的区别 ;转录、翻译和DNA复制的区别;二、参与转录的物质;转录模板 ;5′···GCAGTACATGTC ···3′;5? 3?;不对称转录(asymmetric transcription) 概念与含义 ;特点： 1.都以四种三磷酸核苷的底物作为原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 2.都遵循碱基配对原则: A-U，T-A，C-G， 3.RNA链的延长方向都是5’→3’的连续合成。 3.都不需要引物。 4.都缺乏3’→5’外切酶活性，所以没有校正功能。 ;1.原核生物的RNA聚合酶的基本组成及其功能;核心酶 (core enzyme);RNA聚合酶——原核细胞(RNA polymerase);RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;2.真核生物的RNA聚合酶 真核生物中已发现有四种RNA聚合酶，分别称为RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和线粒体RNA聚合酶，它们专一性地转录不同的基因，因此由它们催化的转录产物也各不相同。;类型 细胞内定位 催化转录产物 对鹅膏蕈碱的反应 Ⅰ 核仁 rRNA前体 耐受 Ⅱ 核质 mRNA前体 极敏感 Ⅲ 核质 5SrRNA tRNA 中度敏感;第二节;;一、转录的起始;(一)原核生物的转录起始过程;(1)启动子的结构;启动子;为了方便，人们将在DNA上开始转录的第一个碱基定为+1，沿转录方向顺流而下的核苷酸序列均用正值表示；逆流而上的核苷酸序列均用负值表示。　;转录起始点 ;2)DNA双链解开;首先σ因子辨认识别-35区位点， RNA-pol的核心酶与之结合并以全酶形式向下移动，到达-10区，在这形成一个紧密的、相对稳定的酶-DNA复合物，同时双螺旋DNA解开约17个bp，形成转录泡，模板链暴露，第一个NTP进入 +1位点。 此时σ因子从全酶解离下来，核心酶继续在DNA链上向下游滑动，而脱落的σ因子与另一个核心酶结合成全酶反复利用。 ;-35;转录泡(transcription bubble)：;(二)真核生物的转录起始;转录起始点;真核基因转录调控的DNA序列---顺式作用元件;与原核基因相比，在顺式作用元件中有较多、较复杂的共有序列，如TATA盒、CCAAT盒等。 但与原核基因不同是，顺式作用元件一般不含结构基因，也不一定与被调控基因串联，有时相距很远，甚至不一定处于上游。;增强子　;沉默子;2. 转录因子和转录起始复合物的形成 ;反式作用因子;参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ ;;二、转录的延长;转录速度大约是每秒钟30-50个核苷酸，但并不是以恒定速度进行的。 由于DNA链与合成的RNA链具有反平行关系，所以RNA聚合酶也是沿着DNA链 3’ 5’方向移动。 转录的延长阶段，原核生物与真核生物之间没有太大差别。;依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止;1. 依赖 ρ(Rho)因子的转录终止;依赖 ρ因子的转录终止;;2. 非依赖 Rho因子的转录终止;回文结构(palindrome) ;转录方向;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ;因而转录生成的mRNA的序列中能形成茎环或发夹式结构，再后继又转录出一连串U。 茎环或发夹式结构可以阻止RNA聚合酶再继续沿DNA移动，并使聚合酶从DNA链上脱落下来，终止转录 ;茎环结构使转录终止的机理; 原核生物与真核生物转录的区别 ;RNA生物合成抑制剂 ;（一）利福霉素及利福平 ;（二）利迪链菌素 ;转录后加工修饰;⑴ 真核细胞每种转录产物都是各种RNA的前身， 即无活性，亦无功