【2017年整理】15与色谱分析法导论.ppt

第十五章 色谱分析法导论;§15-1 概 述;固定相(stationary phase)： 色谱柱中的一相固定不动，称为固定相； 流动相(mobile phase)： 携带试样混合物流过固定相的流体(气体或液体)，称为流动相。 分离原理： 混合物各组分在互不相溶的两相间具有不同的分配系数。 试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在色谱分离柱中的两相间不断进行分配的过程。;1941年，英国生物学家马丁 将经典色谱与适当的柱后检测方法相结合，实现了混合物中无色组分的分离与检测。 色谱分析已成为近代分析的重要手段之一;;图15-2 气相色谱仪;二、色谱法的分类 1.按两相所处的状态分类 按流动相的状态分类：气相色谱法和液相色谱法。 气相色谱法(gaschromatography , GC)： 流动相为气体（称为载气）。 适用于气体和低沸点有机化合物的分析，仪器简单，操作方便，应用广泛。可在不同操作温度条件下使用。 气相色谱法按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱。 ;液相色谱法(liquid chromatography , LC)： 流动相为液体（也称为淋洗液）。 适用于高沸点、不易气化的、热不稳定及生物活性物质的分析，通常在室温条件下工作。 液相色谱法按固定相的不同又分为：液固色谱和液液色谱。 2.按固定相所处的外形分类 按分离柱不同可分为：柱色谱和平板色谱。 柱色谱又分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 平板色谱又分为：薄层色谱和纸色谱。 ;3.按组分在两相间的分离机理分类 （1）吸附色谱法(adsorption chromatography)： 利用不同组分在吸附剂（固定相）上物理吸附性能不同而得以分离的方法。 （2）分配色谱法(partition chromatography) 利用不同组分在两相中有不同的分配系数而达到分离的方法。 （3）离子交换色谱 （4）离子色谱法 （5）空间排阻色谱;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; 三、色谱法的特点 1.分离效能高： 能在较短时间内对复杂混合物、性质相近的有机同系物及旋光异构体等同时进行分离和测定。 2.灵敏度高： 可以检测出μg·g-1(10-6)级， 甚至ng·g-1(10-9)。 3.分析速度快： 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 4.应用范围广： 色谱法几乎能分析所有的化学物质。 （有机、无机、气态、液态、固态） 不适于色谱分离或检测的物质，可通过化学衍生等方法转化为适于色谱分离和分析的物质。;缺点： 对未知物的定性分析较为困难，需要标准品（纯品）。 对于气相色谱分析来说，不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。 发展方向： 色谱-质谱，色谱-红外光谱等联用技术。; 一、分离原理 气相色谱分离过程是在色谱柱内完成的，气固色谱和气液色谱，两者的分离机理不同。 气固色谱的固定相： 多孔性的固体吸附剂颗粒，其分离是基于固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 气液色谱的固定相：由担体和固定液所组成，其分离是基于固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 ;1. 液液色谱（分配色谱柱） 色谱柱内填充着涂在固体担体上的液体固定相，流动相则连续不断地流经其间，两相充分接触，但互不相溶。 2.分配： 组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。 ;图15-4 气相色谱分离过程;二、分配系数和分配比 1.分配系数K(distribution coefficient) 在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度比，称为分配系数，用K表示，即：; K值与温度、压力有关。 K值还与组分的性质、固定相和流动相的性质有关。 试样一定时，K值主要取决于固定相性质，选择适宜的固定相可改善分离效果。 K值的大小表明了组分与固定相分子间作用力的大小。 一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢。 例：某组分K = 0时(即不被固定相保留)最先流出。 试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础，K值相差越大，越容易实现分离。;2.分配比k(容量因子capacity factor ） 在一定温度和压力下，组分在两相间分配达到平衡时，分配在固定