【2017年整理】RNA涤肽转录合成.ppt

第8章 RNA的转录合成 Section 8 RNA Transcription;原核生物RNA的转录 RNA Transcription in Prokaryotes;转录:以DNA为模板,在依赖于DNA的RNA聚合酶催化之下的一系列RNA酶促合成过程叫做转录,包括RNA链的起始、延伸、终止等步骤。 ;;大肠杆菌RNA聚合酶 E.coli RNA Polymerase;1 α亚基: 核心RNA聚合酶有2个α亚基,由rpoA基因编码. 功能： 1）参与RNA核心酶的组装,尚未发现有明确的转录功能。 2）参与全酶和启动子的牢固结合。 3）当RNA聚合酶核心酶沿着模板移动进行RNA链的延伸时,保证DNA双螺旋的不断地在前面解开,在后面恢复双螺旋。;2 β亚基: 是RNA聚合酶的催化中心, 由rpoB 基因编码.可能含有两个结构域, 分别负责转录的起始和延伸.具体是 ：结合核苷酸 底物并催化磷酸二酯键形成 证据:(1)抗生素利福平:与β亚基结合,阻止RNA聚合酶 转录的开始; (2)利迪链菌素也与β亚基结合,抑制转录延伸. ;3 β’亚基:是RNA聚合酶的催化中心，由rpoC 基因编码, 负责核心酶与模板DNA的结合。 ;4 σ因子: 大肠杆菌中最常见的σ因子是σ70. 特性: （1）与核心酶结合形成了全酶,在启动子识别中 起关键性的作用； （2）原核生物含有多种σ因子，以能识别各种类型的启动子； （3）RNA链延伸至8-9nt时， σ因子就离开核心酶； （4） σ因子数量只有核心酶的30%，因此在任何时刻只有1/3的聚 合酶是全酶。;5 ω亚基： ω亚基的功能尚不清楚,也有人认为ω亚基对于RNA聚合酶的结构和功能没有太大的影响。; 大肠杆菌σ70 启动子 The E.coli σ70 promoter;2. σ70的特征 大小40-60bp; -10序列, 也叫pribnow框,含有保守序列 TATAAT, 其中带底线的称为保守T,它存在于目前已知的几乎所有启动子中,一般位于－6(5)到－9(8).该序列是聚合酶启动DNA解旋的序列.;2. σ70的特征(续上) -35序列, 也叫Sextama框,也是RNA聚合酶覆盖的部分。 RNA聚合酶依靠其σ亚基识别该位点,因此又称为RNA聚合酶识别位点。其保守序列为TTGACA。;;启动子效率 -10序列和-35序列之间距离的改变影响启动子的活性。间隔17bp活性最强（16-18，15-20bp） 弱启动子没有-35序列。如：lac启动子，lac基因的表达需要一个辅助激活因子受体蛋白CAP(cyclic AMP receptor proteizod) 与靠近启动子上的CRP位点结合，以增强启动子与RNA聚合酶的结合从而进行转录起始。; 转录的起始、延伸与终止 Transcription, Initiation , Elongation and Termination;1.Promoter binding;12bp;Termination (1)不依赖ρ因子的转录终止(Rho-indepent termination) ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;(2) 依赖ρ因子的转录终止 (Rho-depent termination);ρ因子是RNA聚合酶的一种重要的蛋白质辅助因子。催化解开DNA-DNA和RNA-DNA双螺旋结构。;真核生物RNA的转录 Transcription in Eukaryotes;真核生物RNA聚合酶 Eukaryotic RNA Polymerases ;3种RNA聚合酶的性质和功能;RNA聚合酶亚基 RNA polymerase subunits; 真核生物RNA聚合酶的活性 Eukaryotic RNA polymerase activity ;;真核生物的转录因子;真核生物的启动子 Eukaryotic Promoter;rRNA 基因(rDNA) 人类rDNA编码产生一个45S的rRNA转录物 (13000nt)，这一转录物随后被切成18S (2000nt), 5.8S (160nt) 和 28S (5000 nt)各1个的 rRNA. 人类细胞在不同的染色体上分布有5簇rDNA重复基因（串联基因簇），每簇有40个拷贝，拷贝之间被非转录的间隔序列分开（图） 这种RNA多基因拷贝的连续转录是