微生物学课案.ppt

* * 微生物学教程 第三章 病毒与亚病毒 一、病毒的培养 第四节 病毒的培养和纯化 同微生物学其他学科分支一样，病毒学的进步完全得益于 研究方法和技术手段的发展。 通过病毒的分离与纯化获得纯化的、有感染性的病毒制备物 是病毒学研究和实践的基本技术。 病毒的培养：二元培养物法 一、病毒的培养 噬菌体 细菌培养物 培养液 营养琼脂平板 细菌培养液变清亮 细菌平板成为残迹平板 若是噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板， 经过一定时间培养，在细菌菌苔上可形成圆形局 部透明区域，即噬斑（plague）。 如同对细菌计数一样，形成的噬菌斑也可用于对 噬菌体的数目进行估算。 一、病毒的培养 动物病毒 实验动物 鸡胚 多种细胞培养 一、病毒的培养 大多数动物病毒感染敏感细胞培养能引起其显微表现的改变，即产生致细胞病变效应（cytopathic effect,CPE），例如细胞聚集成团、肿大、圆缩、脱落，细胞融合形成多核细胞，细胞内出现包涵体（inclusion body），乃至细胞裂解等。 蛋白质提纯方法 （盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等） 第四节 病毒的培养和纯化 二、 病毒纯化 标准 纯化的病毒制备物应保持其感染性 病毒是有感染性的生物体 病毒具有化学大分子的属性 纯化的病毒制备物的理化性质应具有均一性 方法 主要化学组成为蛋白质 具有一定的大小、形状和密度 差速离心 梯度离心 （超速离心） 第四节 病毒的培养和纯化 三、病毒的干扰现象和干扰素 两种病毒感染同一细胞时，可出现一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象，称为病毒的干扰现象（interference）。干扰现象可发生于异种病毒间，也可发生于同种异型病毒间，甚至同株病毒中灭活病毒也可干扰活病毒。 1.干扰素的性质和种类 2.干扰素的抗病毒作用 植物感染病毒后的主要症状 植物病毒增殖过程 植物病毒病的控制 第五节 植物病毒和动物病毒 一、植物病毒 黄豆黄萎病毒 花叶、黄化或红化等症状 植株发生矮化，丛枝或畸形等 形成枯斑或坏死等症状 植物感染病毒后的主要症状 植物黄萎病 一、植物病毒 借昆虫刺吸式口器进入 “侵入”方式 通过伤口进入 再通过胞 间连丝或输导组织迅速向其它部位扩散引起普遍感染。 嫁接 植物病毒侵入宿主细胞后才能发生脱壳 植物病毒病的控制 转基因植物抗病毒番茄 选用天抗性品种 改变耕做制度 使用杀虫剂消灭昆虫介体 化学农药 转基因抗病毒植物的开发 二、昆虫病毒 核型多角体病毒(NPV) 质型多角体病毒(CPY) 颗粒体病毒(GV) 专一性高 毒力大 后效长 使用方便 对人畜安全 无公害 缺点危害经济动物 昆虫病毒做为生物农药优点： 昆虫病毒生产过程 斜纹夜蛾病毒杀虫剂及甜菜夜蛾病毒杀虫剂：一种核型多角体病毒（NPV） 饲养昆虫 病毒感染 收集病毒 三、人类脊椎动物病毒 病毒感染对真核细胞的影响 病毒与癌症关系 病毒感染的防治 病毒感染对个体的影响结果 病毒感染对宿主大分子合成的影响 宿主细胞转录的抑制 宿主细胞翻译的抑制 宿主细胞DNA复制的抑制 血液淋巴中的单泡病毒 1.病毒感染对真核细胞的影响机理 被病毒感染的 T 淋巴细胞 病毒对细胞结构的影响 病毒对宿主细胞膜的影响 病毒对细胞骨架的影响 包涵体 细胞凋亡 1.病毒感染对真核细胞的影响机理 细胞无任何明显变化 细胞病变（损伤、死亡） 细胞增生（恶性肿瘤） 病毒感染对真核细胞的影响结果 1.病毒感染对真核细胞的影响机理 2.病毒感染对个体的影响结果 隐性感染 疾病综合症 死亡 瘤形成 携带者 潜伏状态 埃博拉病毒 3.病毒与癌症的关系 原癌基因 （人类基因组中的正常基因） 癌基因 癌症 物理 化学 生物因素 * * * * *