【2017年整理】从DN与A到RNA转录.pptVIP

第三章 从DNA到ＲＮＡ---转录;RNA 的转录;RNA的转录:transcription 酶：转录是一种酶促的核苷酸聚合过程，所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP） 编码链（有义链coding strand ）：与mRNA序列相同的那条DNA链 反义链（无意义链，负链，antisense ）：在RNA的转录中，用作模板的DNA链 增强子：Enhencer 启动子：Promoter 终止子：Terminator 转录单元： 转录区：;上游：Upstream 下游：Downstream 初级转录本：Primary transcript;二、转录的基本过程;酶对启动子的识别是转录的第一步 大肠杆菌启动子：在转录开始位置的上游10个和35个核苷酸位置有两段DNA的序列比较保守，分别称为－10序列（－10 sequence）和－35序列（－35 sequence）。;转录起始位点、-10区、-35区、-10区与-35区之间的间隔。 原核基因转录起始位点通常是嘌呤，其序列为CAT（A为起始位点）。 -10区是一个6碱基保守序列（常以-10为中心）。 -35区是另一个6碱基保守序列（常以-35为中心） 当-10区和-35区中心位置相距16-18bp时，该启动子的功能较强；相距较近或较远时，起始转录的功能都相应减弱。 ;全酶由５个亚基组成，去掉δ亚基的部分称为核心酶，核心酶本身就能催化苷酸间磷酸二酸键形成。利福平和利福霉素能结合在β亚基上而对此酶发生强烈的抑制作用。β亚基似乎是酶和核苷酸底物结合的部位。δ亚基的功能是辨认转录起始点的。β’亚基是酶与DNA模板结合的主要成分。α亚基可能与转录基因的类型和种类有关。　　　　　　　　　　;大肠杆菌RNA聚合酶 亚单位　 分子量　 亚单位数　 组分　　　　功　　能 　α 　 36512 　　　2　　 核心酶　 决定哪种基因被转录 　 　　　　　　　　　　　　　　　　 核心酶组装 　β　　150618　　　1　　 核心酶　　 与转录全过程有关 形成活性中心 　β　　155613　　　1　　 核心酶　　　 结合DNA模板 　δ　　70263　　　 1 　　 δ因子　　 识别不同的启动子　　　 ;启动子选择：RNA聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭复合物 开放复合物形成： δ亚基与-10区紧密结合，确认转录起始点，DNA解链形成开放复合物 开放复合物与最初的两个NTP结合并在这两个核甘酸之间形成磷酸二酯键后转变成包括RNA聚合酶、DNA、新生RNA的三元复合物　 ;8-14亚基　　　　 种类　 分布　　　　合成的RNA类型　 对α-鹅膏蕈碱的敏感性 Ⅰ　核仁　　　　rRNA　　　　　　　 不敏感 Ⅱ　核质　　　　hnRNA　　　　　 低浓度敏感 Ⅲ　核质　　　 tRNA，5sRNA　　　高浓度敏感 Mt 线粒体　单亚基，与Ｔ７类似　　　不敏感　 Ct　 叶绿体　多亚基，与细菌类似　　　不敏感 ;模板的识别-真核; ;转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生：酶与启动子结合后，并在RNA聚合酶（？）的催化下使DNA的双链解离，形成转录泡，为RNA合成提供单链模板，并按碱基配对原则，结合核苷酸，在核苷酸之间形成磷酸二脂键（起始复合物）。 转录起始后直到形成9个核苷酸短链，是通过启动子阶段，此时RNA聚合酶一直处于启动子区，新生的RNA链与DNA链的结合不够牢固，很容易从DNA链上掉下来并导致转录重新开始。一旦RNA酶成功地合成9个以上核苷酸并离开启动子区，转录就进入正常的延伸阶段。所以，通过启动子的时间代表一个启动子的强弱。一般来说，通过启动子的时间越短，该基因转录起始的频率也越高。 当RNA链伸长到8~9个核酸后， δ亚基解离，起始完成，进入RNA的延伸阶段 .; ;转录的延长阶段，原核生物与真核生物之间没有太大差别。 ;４、转录的终止;两类终止信号有共同的序列特征，在转录终止之前有一段回文结构，之间由几个碱基隔开． 不依赖ρ因子的终止序列中富含G·C碱基对，其下游6-8个A； 依赖ρ因子的终止序列中G·C碱基对含量较少，其下游也没有因固定的特