人急性单核细胞白血病细胞系SHI1在裸鼠体内的高致瘤性及其机制的初步研究论文.docVIP

　　人急性单核细胞白血病细胞系SHI1在裸鼠体内的高致瘤性及其机制的初步研究论文 陈苏宁，薛永权，潘金兰，吴亚芳，王勇，岑建农 【摘要】 本研究确定人急性单核细胞白血病细胞系SHI1在裸鼠体内的高致瘤性，并对其成瘤机制进行初步探讨。将SHI1细胞接种至裸鼠皮下，观察肿瘤生长情况；取肿瘤组织行病理检测、R显带核型分析；RTPCR检测MLLAF6融合基因和VEGF基因的转录；明胶酶谱法检测培养上清中基质金属蛋白酶9（MMP9）和MMP2的表达；体外穿膜实验观察迁移能力。结果表明： 注射SHI1细胞的16只裸小鼠均于皮下出现肿块；瘤体由白血病细胞组成；注射的裸鼠中有MLL/AF6融合基因和VEGF基因的转录；在无血清培养上清中MMP9和MMP2的表达明显高于对照细胞；SHI1细胞有较强的迁移能力.freelorigenicity of Human Acute Monocytic Leukemic Cell Line SHI1 in Nude Mice and Its Mechanism Abstract This study origenicity of a novel human monocytic leukemic cell line SHI1 in nude mice and its mechinism. The tumorigenicity in mice ice subcutaneously injected or specimen ination. The mononuclear cells (MNC) of the tumor ography method ployed for the study of migration of the SHI1 cell in vitro. The results shoor masses ude mice after subcutaneous injection of SHI1 cells, the tumor mass ainly posed of leukemia cells, the transcription of MLLAF6 fusion gene and VEGF gene free culture supernatant of the SHI1 cell line ia cell lines, the blocking antibody of MMP2 could inhibit the migration of the SHI1 cell line significantly. It is concluded that the SHI1 cell line presents higher tumorigenicity in nude mice than other leukemia cell line and the mechanism is associated onocytic leukemia; SHI1 cell line; t(6;11)(q27;q23); tumorigenicity; p53 gene 由于动物模型相对于体外实验而言更接近于人体内的真实情况，建立疾病的动物模型对于深入研究疾病的发生机制和治疗方法有着极其重要的意义。白血病的研究同样也离不开白血病的动物模型。然而大多数白血病细胞系在裸鼠体内的致瘤率非常低，如K562细胞系经体内筛选后所得的亚克隆K562/n才具有较高的致瘤率［1］，HL60和其它常用白血病细胞系的致瘤率也较低。近年本实验室建立了国内第1个以t(6;11)(q27;q23)和p53基因异常为特征的人单核细胞白血病细胞系［2］， 命名为SHI1。我们对SHI1细胞系的致瘤特性及其机制进行了研究。 中国实验血液学杂志 J Exp Hematol 2007; 15(4)人单核细胞白血病细胞系SHI1在裸鼠体内的高致瘤性及其机制的初步研究材料和方法 裸鼠饲养 取4周龄NC裸鼠4只和BALB/c裸鼠12只，饲育于NASA1000级净化室内，饲料、饮水和笼具等均灭菌后使用，工作人员按无菌规则操作。 SHI1细胞的接种 白血病细胞系SHI1由本所建立，收集对数生长期SHI1细胞，调整细胞浓度为2×108/ml，给每只裸鼠于右侧背部皮下注射100 μl，每日观察注射部位肿瘤生长情况。 肿瘤组织的病理检测 分离裸鼠实体肿瘤组织，常规固定，石蜡包埋、切片，HE染色。光学显微镜下观察、采集图像。 肿瘤组织中单个核细胞（MNC）的分离 无菌条件下分离裸鼠实体肿瘤组织，眼科剪剪碎，碾磨后经100目和200目滤网过滤，将所得细胞悬液收集至无菌离心管，加入适量RPMI