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【2017年整理】遗传与实验教案学生版
实验一、 减数分裂(3学时)
实验目的
了解高等植物的花粉减数分裂过程,观察其染色体的动态变化,领会减数分裂过程在遗传学基本理论中的意义。
实验原理
减数分裂的定义
减数分裂各时期的主要特征:前期I:细线期——染色体成细长的线状,核膜完整;偶线期——同源染色体开始配对;粗线期——非姊妹染色单体间可能发生交换;双线期——出现交叉;终变期——交叉端化,染色体最为短粗,是计数染色体最佳的时期。
中期I染色体排列在赤道板上,后期I同源染色体分开移向两极,末期I形成两个子细胞
第二次减数分裂同有丝分裂
遗传学意义:1)遗传 2)变异 粗线期及后期I可产生变异
用具及药品
显微镜、解剖针、盖玻片、载玻片、镊子、醋酸洋红、卡诺固定液、乙醇
实验步骤
取材和固定
培养大葱,当花蕾呈嫩绿色表面光滑时进行取材,时间是上午7-10时,将花序总苞剥去,立即投入到卡诺固定业中固定4-24小时,经95%乙醇和70%乙醇各冲洗30分钟,然后换入70%乙醇中保存,4度下可保存一年以上。
染色
取发育程度不同的花序,每个花序按上、中、下不同部位分别镊取2-3个花蕾放于载片上,用解剖针剥出花药,加1滴醋酸洋红染色液,用解剖针反复挤压花药,使花粉母细胞进入染液中,染色5-10分钟。较大的花药可以用刀片横切成3-4段,然后再挤压。
压片
将载玻片放在酒精灯上微烤几次,在材料处加上盖玻片覆以吸水纸,用拇指均匀用力压片。
观察
作业
绘出所观察的花粉母细胞减数分裂各个时期的分裂相。
注意事项
操作过程尽量减少花粉母细胞的遗失
注意区分第一次减数分裂和第二次减数分裂的细胞(第一次细胞为一个大的圆形的细胞,第二次为两个长椭圆型的细胞)
区分花粉母细胞和花药壁细胞(后者为半月型细胞核均匀)
前期、中期区别——核膜有无,后期、末期区分——细胞板是否形成
需要配制药品:
实验二、 染色体组型分析(6学时)
一、实验目的
学习染色体组型分析的方法,了解染色体组型分析的意义
二、实验原理
染色体组(genome):一个二倍体生物配子所含有的全套染色体,称为一个染色体组。而染色体组在细胞分裂中期的表型称为染色体组型或称核型,包括染色体数目(即基数)、形态、大小、着丝点位置及副缢痕、随体的有无等特征。
染色体组型分析就是通过对染色体标本和其照片进行测量、对比分析、配对分组、排列,对组内各染色体的形态进行测量、描述,从而阐明生物染色体组成的过程。
染色体组型分析的意义:
分析未知生物的染色体数目,推断其倍数。首先计数总的染色体数目,然后根据染色体的形态特征进行分组、配对。
将未知生物的染色体组型特征与已知生物的染色体组型特征进行比较,进而对未知生物进行分类,归属于具体的门、纲、目、科、属、种、甚至亚种。
染色体组型分析可以用来鉴别染色体变异包括结构变异和倍数性变异。
三、用具与药品
剪刀、镊子、直尺、硬纸板、浆糊等
实验步骤
制作有丝分裂中期染色体玻片标本
采用植物根尖(如蚕豆、洋葱、大蒜、玉米等)去壁低渗法
培养材料——预处理——前低渗——固定——酶解去壁——后低渗——滴片——染色
选材与显微摄影
选材:细胞间无重叠,胞内染色体数目完整,每条染色体间无重叠,分散良好,染色体粗细适中,都伸展开,处于同一平面上,并且染色鲜明、形态清晰、着丝粒明显,随体可见。
选取上述的细胞进行显微照相。取清楚的底片放大成8cm x 4cm左右的黑白照片。
万寿菊7对=14条
测量(首先对每条染色体随机标号)
测量每条染色体的长臂长度和短臂长度。以着丝粒为起点(若着丝粒过大将其一分为二)分别量至长臂末端和短臂末端(以中间为准)单位为毫米,有随体的染色体,随体的长度可以记入也可以不记入染色体长度之内,但应说明。另外染色体弯曲不能用直尺测量的,可以先用细线量取与染色体等长的长度,再用尺子量出线的相应长度。
计算
绝对长度、相对长度、臂比、着丝粒指数 总长度=1/n所有染色体长度之和(即染色体组内全部染色体长度之和)。相对长度可降低误差,臂比表示两臂相对长度,比值越大,说明二者长度相差越悬殊,进而推断着丝粒位置,长度相近着丝粒位于中央,悬殊时着丝粒靠近短臂末端。
着丝粒指数:为整数如37表示37%,即短臂长度占染色体总长的37%,用短臂所占的比例来描述着丝粒的位置。
配对
依据:同源染色体特征相似(形态、大小、着丝粒位置、随体有无)
从形态上初步推断 2)在形态相似染色体的基础之上比较相对长度
3)着丝粒位置,依据臂比值或着丝粒指数判断 4)有随体的根据随体的大小和位置判断。
对照片上的染色体进行粗剪并进行配对。
排列
先画一直线,将染色体由大到小,短臂在上,长臂在下,着丝粒在直线上进行排列。等长的染色体以短臂长的在前,带随体的染色体及性染色体排在最后。
7、分类:
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