沙蚕体内微生物在农抗、农药降解方向的利用研究.pptVIP

* * * 1.我国有机磷农药的使用情况 2.沙蚕利用研究进展 3.研究的目的与意义 * 1. 机磷农药污染 * 有机磷 农药污染 复杂性 污染源多样，污染物也具有多样性， 复合污染特点日益突出。 普遍性 污染面积增加明显，开始呈连续分布,农田、河流 污染严重 异质性 由多种复杂成分组成的污染物在非流体介质中存在 浓度梯度。 累积性 污染物含量呈增加趋势 持久性 不易被生物利用，污染物存在的持久性 有机磷农药的降解途径 * 光催化降解 氧化降解 光反应产物速率受多种因素影响，不易控制 微生物降解 研究重点和热点 无毒、无残留、无二次污染等优点，是消除和解 毒农药残留的一种安全、有效、廉价的方法 有机磷农药的降解途径 成本过高 2.沙蚕的研究与利用 * 沙蚕（Nereis），俗名“海蜈蚣、海虫”，是广泛分布在近岸海域的无脊椎动物，属环节动物门，多毛纲，游走目，沙蚕科。 国外研究表明：沙蚕对重金属等污染物非常敏感，常被作为环境监测的指示生物（Dallinger R, 1993）。 沙蚕种类繁多，分布广泛。仅我国近海就有80多种，分布在我国的从南至北的各个近岸海域。同时它又是各种鱼、虾和蟹类的饵料。因此，它的丰富度会直接关系近岸海域食物链的兴衰和生物多样性。 最近有研究表明某些沙蚕类群对重金属和石油烃胁迫表现出异常的适应性和高度的耐受性（Mouneyrac C, 2003；Zhou QX , 2003；Christensen M, 2002）。 * 双齿围沙蚕是一种主要生活在海边潮间带的海洋生物，近 年来研究人员已从其体内分离出多种生物活性物质（如：P-胍基异丁酸、羟高铁血红素、磷酸脒基牛磺酸、海蚯蚓素等）。鉴于其可以生活在污染严重的环境，并能帮助改善和治理环境污染(由于沙蚕能摄食底泥中的沉积物、有机碎屑、微生物等有机污染物，常用于海洋污染底质原位修复 。林更明等2009)，故推测其体内可能具有多种生物活性物质或特殊的微生态群，以帮助其拮抗外界污染环境的损害。 3﹑研究目的及意义 目的：针对我国有机磷农药污染问题，从海洋生物沙蚕体内筛选出具体抗菌及高效降解有机磷农药的功能微生物 。 意义：为减少农药对生态环境和人体健康所带来危害，提供微生物资源和技术支撑 * * 沙蚕体内细菌 沙蚕体内真菌 沙蚕体内放线菌 * 活性菌株的初筛 采用杯碟法，将经过初筛活性效果明显的菌株制备发酵液，离心取上清，吸取200μl注入牛津杯，将注入无菌水的平板作为对照。 * SCF-18产物抑菌谱的测定 在无菌条件下，用移液管吸取SCF-18发酵滤液2.5ml于培养皿内，加入融化好的土豆培养基10ml混合均匀。冷却后将各种病原菌菌丝块分别接种于培养皿中央，28℃培养。以无菌水代替发酵液作为对照。当对照组菌丝长至接近皿边缘时，量取菌丝直径（减去菌丝块直径）。 按下列公式求抑菌率： 抑菌率=（对照组菌丝直径-处理组菌丝直径）/对照组菌丝直径×100% 抑菌谱的测定 拮抗菌SCF-18抑菌率 CSF-18发酵液对立枯丝核菌的抑制情况 CSF-18发酵液对大麦根腐病的抑制情况 CSF-18发酵液对大麦根腐病的抑制情况 16SrRNA序列分析（链霉菌属） 16SrDNA序列分析 将大连宝生物（Takara）公司测得菌株SCF-18的16SrDNA序列与Genbank中相关数据进行BLAST相似性分析，根据序列同源性从高到低原则，选取相近的9个菌株的16S rDNA序列，运用MEGA4.0软件构建系统发育树。结果表明：与之同源性较高的均为链霉菌（Streptomyces），其中SCF-18与淡紫灰链霉菌（S. lavendula）同源性为100%。菌落形态、培养等特征与淡紫灰链霉菌（S. lavendula）也相符合。因此，将菌株SCF-18鉴定为淡紫灰链霉菌（Streptomyces lavendula），命名为Streptomyces lavendula strain SCF-18。 * *