【理想树600分考点700分考法】2016届高考生物专题复习课件：专题18基因工程(共25张PPT)分析.pptVIP

考点55 基因工程的工具及操作程序 考点56 基因工程的应用及蛋白质工程 专题18 基因工程 理想树出品 高考考法突破 考法1 基因工程的概念与操作工具分析 应试基础必备 考点55 基因工程的工具及操作程序 考点55 基因工程的工具及操作程序 考法2 基因工程的基本操作程序 应试基础必备 1．基因工程的概念理解 (1)操作环境：体外——关键步骤“表达载体的构建”的环境。 (2)优点：与杂交育种相比，能克服远缘杂交不亲和障碍；与诱变育种相比，能定向改造生物性状。 (3)操作水平：分子水平。 (4)原理：基因重组。 (5)本质：甲(供体提供目的基因)导入乙(受体表达目的基因)，即基因未变、合成蛋白质未变，只是合成场所的转移。 考点55 基因工程的工具及操作程序 2．基因工程的基本工具 (1)限制性核酸内切酶——“分子手术刀” ①来源及化学本质：主要是从原核生物中分离纯化出来的蛋白质。 ②作用：催化作用，可重复利用；可用于DNA的切割(获取目的基因)和载体的切割。 ③作用特点：特异性，即限制酶可识别特定的脱氧核苷酸序列，切割特定位点。 ④切割方式：包括错位切和平切，错位切产生两个相同的黏性末端；平切形成平末端。 应试基础必备 (2)DNA连接酶——“分子缝合针” ①功能：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸间的磷酸二酯键。 ②种类：E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。 (3)基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” ①作用：携带外源基因进入受体细胞，并在受体细胞内对目的基因进行大量复制。 ②必须具备的条件： a．能在受体细胞中稳定保存并复制。载体可在细胞中自我复制或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制。 b．具有一个至多个限制酶的切割位点，以便与外源基因连接。 c．具有特殊的标记基因，供重组DNA的检测与鉴定。 ③种类：最常用的载体是质粒，其他载体有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 3．基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取 获取目的基因的途径主要有以下三种： ①从自然界中已有的物种中分离出来，如从基因组文库或cDNA文库中获取。 ②通过PCR技术扩增获取 a．原理：DNA复制。 b．前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。 c．其他条件：一对引物、四种游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶、能量等。 考点55 基因工程的工具及操作程序 应试基础必备 ③人工合成：常用的方法有化学合成法和反转录法。 考点55 基因工程的工具及操作程序 (2)基因表达载体的构建 ①构建基因表达载体是基因工程中最核心、最关键的一步，在体外进行。其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 ②基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子以及标记基因等， 如图所示。 a．启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA。 b．终止子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。 c．标记基因：筛选、鉴别受体细胞是否含有目的基因。 应试基础必备 ③基因表达载体的构建方法 考点55 基因工程的工具及操作程序 (3)将目的基因导入受体细胞 ①转化的概念：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 应试基础必备 ②常用的转化方法和过程 返回考点目录 ③转化的实质：目的基因整合到受体细胞基因组中，从而使受体生物获得新的遗传特性。 (4)目的基因的检测和表达 考点55 基因工程的工具及操作程序 细胞类型 常用方法 受体细胞 转化过程 植物细胞 农杆菌转化法 体细胞 将目的基因插入Ti质粒的T－DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上 动物细胞 显微注射法 受精卵 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵→获得受精卵→显微注射→早期胚胎培养→胚胎移植→发育成为具有新性状的动物 微生物 细胞 Ca2＋处理增大细胞壁通透性 原核细胞或酵母菌 用Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收 高考考法突破 角度1　基因工程的概念分析 考法1　基因工程的概念与操作工具分析 考点55 基因工程的工具及操作程序 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 剪切→拼接→导入→表达 结果 人类需要的基因产物 角度2　几组概念的辨析 1．E·coli DNA连接酶与T4DNA连接酶的比较 常用类型 E·coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 功能 只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷