考试报,高中生物实验试剂配制方法.docVIP

高中生物实验试剂配制方法? 徐以润 江苏灌南县高级中学（222500） 1、斐林试剂????试剂：将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中，加0.5亳升硫酸，混合均匀。????试剂：将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。（贮于带橡皮塞的瓶中）????临用时试剂与试剂等量混合氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀 因此，斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。 2、双缩脲试剂????取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。 　　取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成，但二者有如下三点不同： （1）溶液浓度不同 斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05g/ml；双缩脲试剂中NaOH溶液（双缩脲试剂A）的浓度为0.1g/ml，CuSO4溶液（双缩脲试剂B）的浓度为0.01g/ml。 （2）使用原理不同 斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生紫色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。 （3）使用方法不同 斐林试剂使用时，先将 NaOH溶液和CuSO4溶液混合（将4～5滴CuSO4溶液滴入2mlNaOH溶液中），而后立即使用：双缩脲试剂使用时，先加入NaOH溶液（2mL），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，振荡摇匀后观察现象。 3、苏丹试剂：????0.1克苏丹溶于20毫升95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。4、二苯胺试剂：????将1克二苯胺溶液于100ML冰醋酸中，再加2.75毫升浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。 5、苔黑酚——乙醇溶液（用于RNA的鉴定） ????溶解6克苔黑酚于是100毫升95%乙醇中，（可在冰箱中保存1个月） 6、班氏试剂：用于的????溶85克柠檬酸钠及50克无水碳酸钠于400毫升水中。另溶8.5克硫酸铜于500毫升热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中，边加边搅拌。如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。、醋酸洋红染液????冰醋酸45ML＋55ML蒸馏水＋0.5克洋红????先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸 10分钟，待冷却后，即可使用。、有丝分裂细胞解离液???? 38%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。、有丝分裂细胞染液????医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合 配成染色液。、吲哚酚试剂（用于VC的鉴定）????将 0.1克吲哚酚粉未溶于是100ML水中。、卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）????酒精：冰醋酸=3：1（体积比）、20%肝脏研磨液用于????1份肝脏4份水。用剪子迅速将肝脏剪碎，先加少量的水研研磨，用剩余的水冲洗。 1