一例体细胞克隆水牛脂肪及皮肤的组织结构观察.docVIP

一例体细胞克隆水牛脂肪及皮肤的组织结构观察 摘要：应用光镜及ｈｅ染色等技术对体细胞克隆水牛的脂肪和皮肤组织及其细胞类型和形态进行了详细的观察，旨在为以后体细胞克隆牛的研究提供一定的理论依据，结果表明，脂肪组织外周有疏松结缔组织包裹，脂肪小叶不明显；皮肤由表皮和真皮构成，借助皮下组织与深部的肌肉相连，局部表皮有脱落，皮肤上有毛囊分布。 关键词：水牛；体细胞克隆；脂肪；皮肤 ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆａｔ ａｎｄ ｓｋｉｎ ｉｎ ｓｏｍａｔｉｃ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｆｅｒｅｄ ｂｕｆｆａｌｏ ｗａｎｇ ｘｉａｏ－ｌｉ１，ｚｈｏｕ ｓｈｉ－ｑｉｏｎｇ１，ｌｉ ｂｏ２，ｗｅｉ ｘｉａｏ－ｒｕｉ１，ｃｕｉ ｋｕｉ－ｑｉｎｇ１，ｓｈｉ ｄｅ－ｓｈｕｎ１ （１． ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ａｎｉｍａｌ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ｇｕａｎｇｘｉ ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００５ ，ｃｈｉｎａ； ２． ａｑｕａｔｉｃ ａｎｉｍａｌ ｈｕｓｂａｎｄｒｙ ａｎｄ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｂｕｒｅａｕ， ｊｉｎｘｉｕ ｙａｏ ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ ｃｏｕｎｔｙ，ｌａｉｂｉｎ ５４５７００，ｇｕａｎｇｘｉ，ｃｈｉｎａ） ａｂｓｔｒａｃｔ： ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｓｏｍａｔｉｃ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｂｕｆｆａｌｏ， ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｅｌｌ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ ａｎｄ ｓｋｉｎ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ｓｏｍａｔｉｃ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｆｅｒｅｄ ｂｕｆｆａｌｏ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ａｎａｔｏｍｙ， ｈｅ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ． ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｓｏｍａｔｉｃ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｂｕｆｆａｌｏ ｗｅｒｅ ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｌｏｏｓｅ ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ， ａｎｄ ｔｈｅ ｆａｔ ｌｏｂｕｌｅ ｗａｓ ｎｏｔ ｏｂｖｉｏｕｓ； tｈｅ ｓｋｉｎ ｗａｓ ｃｏｍｐｏｓｅｄ of ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ａｎｄ ｄｅｒｍｉｓ， ａｎｄ ｃｏｎｎｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｂｙ ｈｙｐｏｄｅｒｍｉｓ． ｐａｒｔ ｏｆ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ｗａｓ ａｂｓｃｉｓｓｉｏｎ． ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｈａｉｒ ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ． ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｂｕｆｆａｌｏ； ｓｏｍａｔｉｃ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｆｅｒ； ｆａｔ； ｓｋｉｎ 自从１９９７年体细胞克隆羊“多莉”出世以来，体细胞克隆动物已成为当前科学研究的热点之一。目前已成功克隆出了牛、羊、猪、兔等动物［１－４］。我国研究人员也在动物体细胞克隆方面进行了大量的研究。其中广西大学动物繁殖研究所就先后成功地获得了体细胞克隆水牛和体细胞克隆黄牛［５］。 本试验对出生后不幸夭折的体细胞克隆水牛进行剖检，发现小牛犊的皮肤表面无毛附着，局部皮肤脱落；脂肪组织呈黄蜡样干酪状，手捏无油性，对所取皮肤和脂肪组织进行固定，通过光镜及ｈｅ染色等技术对体细胞克隆水牛皮肤及脂肪组织结构进行了观察分析，为以后体细胞克隆水牛的研究提供必要的理论支撑。 １ 材料与方法 脂肪及皮肤组织取材于广西大学动物繁殖研究所的体细胞克隆水牛。此克隆水牛出生时死亡，对其进行解剖，取皮肤和脂肪组织，然后用７５％的酒精固定，经脱水、透明、石蜡包埋后切片（厚度７ μｍ），再ｈｅ染色［６］，在光镜下观察、显微摄影。 ２ 结果与分析 ２．１ 脂肪组织 解剖后发现，体细胞克隆水牛体内脂肪组织呈黄蜡样干酪状，手捏无油性，质感呈干肉状。经ｈｅ染色后，低倍镜下观察发现，脂肪组织外周有疏松结缔组织包裹，脂肪小叶不明显（图１）。 高倍镜下，脂肪组织由大量脂肪细胞聚集而成，细胞表面有少量致密而纤细的纤维成分，基质含量极少。在脂肪组织内的疏松结缔组织较少，有小血管存在。脂肪细胞较大且边缘不规则，呈球形、卵圆形或多角形。细胞核不可见，细胞内的脂滴呈现大空泡形（图２）。 ２．２ 皮肤 解剖后发现，体细胞克隆水牛皮肤呈棕黑色，表面无毛附着，局部皮肤脱落。 ｈｅ染色后，低倍镜下发现，皮肤由表皮和真皮构成，借助皮下组织与深部的肌肉相连，局部表皮有脱落，皮肤上有毛囊分布（图３）。 高倍镜下，表皮由复层扁平上皮构成，未发现角化层，基底层附着于基膜上，由一层矮柱状的基底细胞组成。胞质内因有丰富的游离核糖体而呈嗜碱性，故染色较深；表皮局部与真皮层脱离。真皮位于表皮下方，分层不明