病理实验流程程序.pdfVIP

Pathology 病理学 病理实验室工作流程、 相关技术简介 Pathology Pathology 一、工作流程 工作流程 Pathology 二、工作制度 标本接收与清点制度 制片 读片 资料管理制度 仪器设备维修和保养制度 Pathology 标本接收与清点制度 接收-核对-签收-编号-取材登记记录-扫描-录入 Pathology 资料管理制度 玻片-蜡块-申请单-报告单-登记本 Pathology 三、相关技术简介 1.常规H.E染色制片技术 即常规石蜡包埋切片技术，将所研究的组 织用固定液固定，再经过水洗、梯度乙醇脱 水、二甲苯或TO透明剂透明、浸蜡等处理， 然后用石蜡包埋剂支持组织进行切片、苏木 素-伊红（H.E）染色的技术。 适用于没有特殊固定要求的一切组织；所 获得的组织切片还可用于多种染色。 Pathology 注意事项： 标本均需用固定液固定； 大标本按自然状态切开固定，10倍体积的固定液； 取材后立即投入固定液固定，72小时内制片最佳； 取材大小：长2厘米，宽1.5厘米，厚3毫米； Pathology 固定液的选择： 无特殊要求-用10%中性福尔马林（甲醛）溶液固定。 （37-40%原液低于15度久置变甲酸。通常取原液10ml加 水90ml配成10%福尔马林液，实际上只有3.7-4%的甲醛浓 度。免疫组化、原位杂交、FISH、突变、PCR效果好)； 糖原、尿酸结晶-80～95%乙醇； 脂肪、睾丸、皮肤-Bouin液（1.22%饱和苦味酸水溶液 75ml、甲醛液25ml、冰醋酸5ml）； 磷酸酶、酯酶、氧化酶-丙酮； Pathology 固定液的选择： 皮下肥大细胞固定-AF液(95%乙醇90ml、甲醛液10ml）； 电镜观察标本-2.5-4%戊二醛--保存蛋白质和核酸； （0.2mol/LPB50ml+25%GA12ml+双蒸水38ml-3%100ml） -0.1%四氧化锇--保存脂类。 Pathology 组织的处理（机器操作）： 包括固定、脱水、透明、浸蜡和包埋，是制作优 质切片的关键，一旦组织处理有欠缺，往往导致 无法挽回的后果。  （1）制片过程按操作流程进行。  （2）包埋用石蜡必须过滤。  （3）试剂必须按要求及时更换。 Pathology 切片： • 切片是制片技术中非常重要的环节。影响切片质量的因素 很多; • 组织块固定、脱水、透明和浸蜡的质量直接影响切片的质 量； • 优质的切片机是制备优质切片的重要前提； • 对技术人员的技能要求也很高，即使是同一蜡块，使用同 一台切片机和同一切片刀，不同的操作者也会切出不同质 量的片子。 Pathology 切片：  (1)切片刀必须锋利，切片过程中用力均匀；切片 厚度以4µm为宜。切片必须完整，无污染、皱褶和 刀痕。  (2)组织片贴附应在除去标签位置后居玻片的中间， 各块组织的方向应一致。  (3)小活检组织须做间断连续切片。 Pathology 染色封片：  (1)烤片温度应在60~62℃左右，不得高于65℃，时间不能 少于20min。