【2017年整理】HIV作业指导书2.docVIP

质量管理体系文件（三） HIV筛查实验室作业指导书 （ 第一版） 宜昌市第一人民医院检验科 2009年4月20日 目 录 序号 主 题 内 容 代 号 页号 1 修订页 JYK-HIV-XDY 4 2 批准书 JYK-HIV-PZS 5 3 4 人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测 JYK-HIV-01 6 4 HIV室内质控作业指导书 JYK-HIV-02 10 5 酶标分析仪作业指导书 JYK-HIV-03 13 6 BIO-RAD全自动酶标洗板机作业指导书 JYK-HIV-04 15 生物安全柜使用作业指导书 JYK-HIV-05 生物安全柜维护和保养作业指导书 JYK-HIV-06  修 订 页 序号 文件编号 页码 需更改的内容 更改内容 批准人 批准日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19  批 准 书 本《作业指导书》依据ISO15189：2003《医学实验室—质量和能力的专用要求》标准编制而成，它阐述了宜昌市第一人民医院检验科的质量方针和质量目标，并对各项质量的技术活动的工作程序、操作方法作了具体描述和规定，是本实验室各项质量和技术活动所依据的指导书。HIV筛查实验室全体人员必须严格遵守并认真执行。 本《HIV筛查实验室作业指导书》第一版已经检验科管理层审定，现予批准，并自批准之日起生效。 批准人签字： 批准人职务：宜昌市第一人民医院检验科主任 批准 日期： 年 月 日1. 原理2. 标本采集 2.1 采集前病人准备：受检者应空腹 2.2 标本种类：血清或血浆 2.3 标本要求：采集病人静脉血3ml（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。 3. 标本储存：2-8℃保存不应超过，-20℃不应超过3个月，-70℃长期保存，应避免反复冻融。 4. 标本运输：密封，室温运输。 5. 标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。 6. 试剂 6.1 试剂名称：抗体诊断试剂盒 6.2 试剂生产厂家：有限公司6.3 包装规格：96/盒 6.4 试剂盒组成： 微孔板，酶，阳性对照，阴性对照，洗涤液，A，B，终止液，封，自封袋。 6.5 试剂储存条件及有效期：2-8℃避光保存，有效期个月。 7. 仪器设备 7.1 仪器名称：自动酶标仪 7.2 仪器厂家：芬兰雷勃 7.3 仪器型号：MK3 8. 操作步骤 8.1 平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。 8.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：稀释后使用。 8.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。加样：50(l，对照孔中加入阴、阳性对照各50(l温育：置37℃温育0分钟。洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。加酶：分别在每孔中加入酶0(l（空白对照空除外），。温育：置37℃温育0分钟。 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。显色：每孔加入A、B各50(l，混匀，置37℃分钟。终止：每孔加终止液50(l，混匀。测定：用酶标仪双波长450/630nm测定各孔OD值（0分钟内完成测定，并记录结果）。9. 结果判断与分析值阴性对照OD值阴性对照OD值于0.05时以0.05计算结果判定：样品OD值阳性 样品OD值性10. 质量控制 每用含的质控血清同步检测，以S/CO值绘制质控图，S/CO值应在控制范围内；如失控则要检查试剂效期、储藏温度、试验温度是否正常、操作步骤是否正确，直至重新试验使其在控。 11. 参考范围 阴性 12. 临床意义 13操作性能：灵敏度高，特异性好。 14. 方法局限性：样品显色深浅与样品中抗体的含量没有一定正相关。 15. 注意事项 15.1 15.2 本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。 15.3 样本的加样建议使用微量加样器准确加入。酶标抗原需用微量加样器加液，并经常校对其准确性。加酶标记