【2017年整理】植酸酶.docVIP

水 产 动 物 营 养 学 生命科学学院 水产养殖第8组 引言： 大部分鱼类饲料都以植物性原料为基础，而60％～80％的磷结合在植酸中，很难为鱼类消化利用。为满足鱼类对磷的需要，饲料中又添加了大量磷， 由于鱼体内缺乏分解植酸的内源性植酸酶，未被动物体利用的大量植酸磷排出体外，造成磷的浪费；排出体外的磷进入土壤和水中，造成BOO(生化需氧量1和COD(化学需氧量)值升高，水中溶氧量减少、水质恶化等，养殖水体中排放的饲料磷促使水体中浮游植物大量繁殖，甚至可能诱发赤湖，造成海中浒苔泛滥，给江河湖泊及海水带来巨大的损失。本实验在饲料中添加浓度（％） 一、实验方案 1.材料与方法 1.1 实验用鱼：罗非鱼，河南新乡 中文学名： 罗非鱼 亚纲：辐鳍鱼亚纲 拉丁学名：Tilapia 目：鲈形目 别称：非洲鲫鱼、南鲫、越南鱼 亚目：鲈形亚目 界：动物界 科：丽鱼科 门:脊索动物门 属：罗非鱼属 纲：鱼纲 罗非鱼（Tilapia）为一种中小形鱼。现在它是世界水产业的重点科研培养的淡水养殖鱼类，且被誉为未来动物性蛋白质的主要来源之一。原产于非洲，属于慈鲷科之热带鱼类，和鲈鱼相似。通常生活于淡水中，也能生活于不同盐份含量的咸水中，可以存活于在湖，河，池塘的浅水中。它有很强的适应能力，且对溶氧较少之水有极强之适应性。绝大部分罗非鱼是杂食性，常吃水中植物和碎物。此鱼在面积狭小之水域中亦能繁殖。甚至在水稻田里能够生长。食物是促进鱼类生长的最重要的因素之一，鱼类吸取的食物及营养物质的分配利用是有效提高养鱼产量的前提。 1.2 实验设计与实验饲料 80尾平均体重为的鱼，选自河南新乡。随机分为组：对照组组个重复，每个重复尾鱼。各组的饲料配比如表1。 原料 对照组Ⅰ（%） 试验组Ⅱ（%） 试验组Ⅲ（%） 试验组Ⅳ（%） 20 20 20 20 鱼粉 25 25 25 25 大豆粕 25 25 25 25 菜粕 13 13 13 13 麸皮 12 12 12 12 大豆油 60ml 60ml 60ml 60ml 多维 0.6 0.6 0.6 0.6 多矿 1.2 1.2 1.2 1.2 胆碱 0.6 0.6 0.6 0.6 三氧化二铬 0.5 0.5 0.5 0.5 水 5 5 5 5 植酸酶 0 0.1 0.2 0.3 1.3 饲养管理 试验在河南师范大学水产养殖基地流水养殖系统中进行，每天饲喂、，为%-4 %，饲喂期为 2 .测定指标 2.1 生长指标 试验结束后，各组的试验采用电子天平逐条称量体重（精确到0.01g）计算试验的增重率 2.2 血液免疫指标测定 2.2.1 采样 每重复随机取尾鱼，制备血清，将所抽取的全血离心1min，取上清， 2.2.2 溶菌酶活性 每个样品取3 ml菌悬液，吸取0.04 ml血清加到3 ml菌悬液中，混匀后立刻在25 ℃，540 nm处测定0 min和30min的吸光度值。以每分钟吸光度值降低0.001为1个酶活单位 2.3 表观消化率及饲料干物质的测定 2.3.1 收粪 投喂试验饲粮 15天后， 采用虹吸法，在每天投喂 2 h后开始收集粪便,收集时用捞网捞起条状粪便， 用镊子选择新鲜、 外表带有包膜、尽可能完整的粪便放人干净培养皿中，6O℃烘干，共收集9天的粪便，4℃保存，待测干物质、表观消化率等 2.3.2 饲料干物质的测定 洁净称样皿，在105℃±2℃烘箱中烘1h（以温度到105℃开始计时），取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min称重。再同样烘干1h，冷却称重，直至两次称重之重量差小于0.002g。 称取1克饲料，在105℃±2℃烘箱中烘2h取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min称重。再同样烘干1h，冷却称重，直至两次称重之重量差小于0.002g。将称样皿放在干燥器中，待测表观消化率。 2.3.3表观消化率的测定（三氧化二铬的测定） 称取样品1g ，置蒸发皿中，加入20%碳酸钠溶液5ml ,使充分浸润,先低温炭化,待浓烟挥尽，移入580℃高温炉中灰化成白色灰烬,冷却。用25ml水分次洗入150ml 三角瓶中,加2%高锰酸钾溶液5滴,使成紫红色,煮沸5～10min ,煮沸过程中应保持溶液呈紫红色,否则应补充2%高锰酸钾溶液。然后沿瓶壁加入乙醇2ml，继续加热至溶液变为黄棕色,冷却,用5mol/l 硫酸调节溶液呈酸性(pH=1～3) ,摇匀并过滤于50mL容量瓶中,用水洗涤三角瓶和滤纸,合并滤液。溶液经Cr3+定性检查已不显色,证明Cr3+完全转化为Cr6+。加入2.5ml 二苯胺基脲溶液摇匀,加水至刻度,10 min后于（540±1）nm 波长处测定其吸收度。用此法还需测定标准溶液的吸光值，绘制标准曲线。 二、实验结果处理及分析 1、溶菌酶