HCV感染后肝硬化组织中整合素α3和αM的表达水平、部位及其意义论文.docVIP

　　HCV感染后肝硬化组织中整合素α3和αM的表达水平、部位及其意义论文 徐心，黎一鸣，吉鸿，候崇智，程颖波，赵晓鸽 【关键词】 整合素 Localization and expression level of integrin subunits α3 and αM in human cirrhotic liver 【Abstract】 AIM: To investigate the value of integrin α3 and αM subunits as the markers of hepatic fibrosis in patients matory liver cirrhosis by determining their localization and expression levels in the cirrhotic liver after HCV infection. METHODS: ed basement membranes (BM) ainly located around the central vein and αM positive areas ent of capillarized sinusoids and play an important role in the initiation of liver cirrhosis. αM subunits can be used as a useful index in clinical tests. 【Keyent membrane; liver cirrhosis 【摘要】 目的：通过观测HCV感染后肝硬化组织中整合素α3β1亚单位和αMβ2亚单位表达水平和部位，研究其在肝硬化发生、发展中的分子标志意义. 方法：在知情同意的前提下，选择3例用于肝移植的正常供肝组织作为正常对照组.freel，厚0.5 cm的肝组织标本，40 g/L多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片. 1.2方法 各组标本石蜡切片分别按照α3和αM免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程公司)染色. 染色为棕黄色颗粒者为阳性细胞. 采用LEICA图像分析系统软件400倍视野计算阳性细胞分布面积比例和区域，-阴性;＋阳性表达面积 30％； 30％~50％； 50%. 统计学处理： α3和αM表达水平和部位数值比较应用阳性表达判定方法参照Ouondamatteo等［2］的免疫组化研究结果. 2.2整合素α3和αM亚单位表达水平和部位特征正常肝组织中无整合素α3表达，肝硬化时阳性表达率为41.7％（5/12），可见肝细胞条索紊乱，小叶中央静脉周围可见部分肝细胞变性、坏死，纤维组织沉积，整合素α3亚单位表达阳性的细胞（Fig 1A）. 阳性表达部位主要位于小叶中央静脉周围肝细胞和肝窦内皮细胞膜表面. 同时肝血窦数目减少，血窦面积缩小，内皮细胞和肝细胞之间可以见到整合素α3亚单位高表达的阳性区域，形成层状基底膜样结构（Fig 1B）. 正常组织中无整合素αM亚单位表达. 肝硬化组织中表达阳性率为75％（9/12）. HCV感染后肝硬化组织整合素αM亚单位有较大的阳性表达，阳性面积 30％（Fig 2A）. 高倍镜下，可见阳性区域主要位于肝细胞膜和周围胞质（Fig 2B）. 2.3整合素α3和αM表达水平和部位差异如Tab 1所示，αM阳性表达水平高于α3，两者比较差异有显著性（P 0.05）. 而Child分级A，B和C组间比较差异无显著性. 根据肝腺泡（Liver acinus）理论，将肝小叶分为3个连续的区域，即Ⅰ，Ⅱ和Ⅲ区. Ⅰ区为临近门管区的肝组织，Ⅱ区为小叶中央静脉周围肝组织，Ⅲ区为前两者之间肝组织. 如Tab 2所示，αM阳性表达区域多位于Ⅲ区，而αM阳性表达区域多位于Ⅱ区，但是因为免疫组化阳性面积图像分析对微观结构尚不能准确定量，所以两者部位比较差异无显著性.表1不同Child分级肝硬化组织中α3和αM的表达水平（略）表2不同Child分级肝硬化组织中α3和αM的表达部位（略） 3讨论 尽管我国肝硬化主要病因是乙型肝炎，HCV感染后肝硬化发生率占10%~20％，但是由于HCV感染隐匿，许多患者已经发展到肝功能失代偿时才得到确诊. 而且HCV导致肝硬化和肝细胞癌（HCC）发生率较高，其中肝硬化失代偿是HCV感染患者最重要的死亡原因. 所以找到HCV感染后肝硬化的起始事件，是HCV肝硬化治疗、预防的关键. 肝窦毛细血管化是肝硬化发生的中心环节，新生的基底膜组织形成是其主要的表现. 细胞外基质（extracellular matrix， ECM）生成/降解平衡紊乱是肝窦毛细血管化的重要机制，而整合素是介导肝实质/非实质细胞与ECM之间信号转导、以及星状细胞（H