PTCA球囊封堵冠状动脉制作猪急性心肌梗死再灌注模型及判定论文.docVIP

　　PTCA球囊封堵冠状动脉制作猪急性心肌梗死再灌注模型及判定论文 靳激扬，滕皋军，冯毅，吴燕平，金琴娣，王宇，卢勤，章晓国.freelin，再灌注60min后，用坏死特异性对比剂（EC60）增强MRI在活体确定梗死区；离体标本进行氯化三苯基四氮唑（TTC）组化染色验证梗死区。结果:成功建立8只猪急性心肌梗死动物模型，活体ECIII60增强MRI高信号区与离体TTC染色所示梗死区部位与面积一致（P 005）。结论:应用PTCA球囊封堵猪冠状动脉可成功建立急性心肌梗死动物模型，这种模型具有重复性好、可控性强的优点，且创伤较小，接近临床病理生理过程，可作为急性心肌梗死研究的技术平台。 ［关键词］心肌梗死；血管成形术；模型, 动物；对比增强MRI;猪 心肌梗死是严重危害人类健康的心血管疾病，其动物模型建立是完成相关实验的前提。随着介入技术的普及开展，应用经皮腔内冠状动脉成形术（PTCA）球囊堵闭冠状动脉造成心肌梗死模型已成为可能。本研究采用PTCA球囊堵闭冠状动脉左回旋支第一钝缘支建立猪急性心肌梗死动物模型，并进行评价与判定。 1 材料与方法 11 材料 111 试验动物 中华小型猪8只，雄性，体质量18~25kg。 112 药物 氯胺酮、安定、阿托品、戊巴比妥钠、肝素钠、利多卡因、欧乃派克、坏死特异性对比剂（EC60）、氯化钾、琼脂、氯化三苯基四氮唑（TTC）。 113 器材 PTCA所需材料包括各种导丝、导管、动脉鞘以及压力泵等，数字减影血管造影机、磁共振机、心电监护仪、呼吸机、气管插管、静脉泵、氧气瓶、手术器械包。 12 方法 121 麻醉过程 肌肉注射安定1mg kg-1、氯胺酮10mg kg-1、阿托品1mg进行基础麻醉；静脉泵持续静脉滴注戊巴比妥钠01mg （kg min）-1维持麻醉。气管插管后接呼吸机辅助通气（呼吸频率15次 min-1，潮气量400ml 次-1），接心电监护仪监测血压、心率和心电图。 122 球囊堵闭冠状动脉过程 肝素化后分别行左、右冠状动脉造影观察猪冠状动脉的分布情况。将PTCA球囊送至左回旋支第一钝缘支，先行缺血预处理，无明显异常反应后，再以3～6个大气压扩张球囊封堵血管，造影证实球囊远端血流中断。90min后将球囊抽成负压状态撤出，重新造影显示第一钝缘支远端血流再通。 123 MRI扫描 再灌注60min后，通过冠脉导管缓慢注入以生理盐水稀释的20ml ECⅢ60（0005 mmol kg-1），作垂直于室间隔的自心尖向心底的多层短轴面延迟强化扫描（层厚5 mm，间距0 mm），扫描范围覆盖整个左室。 124 病理检查 扫描结束后处死动物，完整取出心脏。垂直于心脏长轴，用组织大切片机自心尖向心底将琼脂固定塑形的心脏切成5mm厚的短轴面切片，然后行TTC染色。 125 数据分析 计算相对梗死面积比（MRI梗死区面积/TTC梗死区面积），均取3次测量平均值作为最终测量结果。数据以±s表示，采用SPSS 115软件进行t检验，检验水准α=005（双侧），P 005具有统计学意义。 2 结果 21 急性心肌梗死模型建立冠脉造影显示试验猪的冠状动脉分支及其分布同人类极为相似，但其侧支循环较稀疏，吻合支细小且较少。PTCA球囊成功导入冠状动脉左回旋支第一钝缘支，8只猪均完成球囊封堵90min及血流再通灌注（图1）。 图1 球囊堵闭左回旋支第一钝缘支再灌注（略） Fig 1 Coronary angiograms during reperfusion of the obtuse marginal branch of LCX by balloon occlusion 22 MRI与TTC染色判定梗死区部位与范围对照MRI延迟强化区与TTC染色所示梗死区分布一致，均位于左旋支供血区的左室侧壁。与梗死面积评判金标准TTC染色比较，两者没有显著性差异（t = 0329, P = 0747, P 005）（图2、3）。 图2 ECⅢ60增强心脏MRI显示左室侧壁梗死区呈楔形高信号（略） Fig 2 ECⅢ60enhanced cardiac MRI shoal myocardium appeared brick red and the infarcted area in-1,潮气量为400ml 次-1，当行MRI人工屏气检查后，行暂时性过度通气（呼吸频率12次 min-1，潮气量900ml 次-1）。实验过程中可酌情使用阿托品以减少呼吸道分泌物,保持呼吸道通畅。 323 球囊堵闭与缺血预处理 由于猪冠状动脉侧支少，心肌、心脏传导系统对缺血耐受性差，堵闭冠状动脉主要分支后极易引起大范围心肌梗死和各种恶性心律失常，死亡率较高。本实验参考前人［5］研究成果，选择放置球囊于左回旋