木犀草素、黄芩苷和大黄素对肝癌自杀基因治疗旁杀伤的增效作用.pdf

1中药活性成分对自杀基因旁观者效应的体外筛选结果 p p 单纯木犀草素在5 M与10M浓度下的抑制率分别为13．8±2．95％与28．93土 M浓度下联合lo％tk+／GcV 5．49％，It50为26uM即8．58ug／mL。木犀草素在5lIM与10u 和1．176，均大于1．15，说明是协同作用；在木犀草素20lIM和40uM的浓度下，联 1．15之间，说明是相加作用。黄芩苷与大黄素各浓度作用下，联合10％tk+／GCV的金正 钧Q值均在0．85与1．15之间，是相加作用。 2木犀草素对大鼠肝癌细胞CBRH7919杀伤作用的凋亡机铝9探讨结果 鼠肝癌细胞凋亡率，并使细胞较多的停滞于S期，单独木犀草素对凋亡率提高不显著， 对大鼠肝癌细胞周期也无明显影响。 (2)甲基绿一派诺宁染色和丫啶橙染色均核膜不光滑平整、核皱缩或碎裂，细胞 质出现较多空泡等典型细胞的凋亡形态，表明木犀草素对CBRH7919有诱导凋亡的作 用。 (3)琼脂糖凝胶结果是出现有规律的DNA条带，而不是涂布状条带，也说明木犀 草素对CB褂i7919作用是诱导凋亡。 3木犀草素对大鼠肝癌细胞CBRH7919缝隙连接及相关蛋白表达影响的结果 (1)sL仍T法显示，经木犀草素处理32小时后的，荧光染料不仅出现在划痕的 附近细胞内，而且在划痕以外的3-4列细胞内也出现了荧光(++++)，划痕两边被染 色的细胞明显增多，出现了明显的细胞间染料传输的现象，说明细胞的缝隙连接通讯 功能获得增强。 而且木犀草素作用48h的蛋白电泳条带比其作用24h又要宽，颜色要深。这说明木犀 结论： 本文在细胞水平实验探讨了中药活性成分木犀草素、黄芩苷和大黄素对 HSv-TK／GCV自杀基因疗法的增效作用，发现木犀草素能有效提高自杀基因对肿瘤细胞 的抑制率，提高旁观者效应，而且有协同增效作用，然黄芩苷和大黄素与lO％tk+／GCV 联合则未显示有协同增效作用。其机制研究结果表明，很可能是通过增强CBRH7919 细胞的GJIC或诱导凋亡，调节细胞周期等来起作用，也可能是几个机制同时起作用。 关键词木犀草素；黄芩苷；大黄素；自杀基因；凋亡；缝隙连接 Ⅱ The BaicaIinand UtiI ReserchofLuteoIin Emodin Enhancingity Effect”ofHSVl一，tkGCV oN“Bystdander System andWwsternMedicine ofChinese Basis Speciality：Integration Author：Yizhen Ning Tutor：Prof．YuhuiTan ABSTRACT of which tumors toakind seriousdisease Malignantbelong endanger human’shealthandeventheirlives．Genesheds on therapy1ightspatients whoare fromthiskindofdisease．Incountries，genetherapy suffering foreign trailafter