实时荧光定量PCR 检测蔬菜病原细菌技术.pdfVIP

中国蔬菜　2013（4）：1-5 CHINA VEGETABLES 实时荧光定量 PCR 检测蔬菜病原细菌技术 陈　璐　谢学文　石延霞　李宝聚 * （中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081） 摘　要：植物病原菌的实时荧光定量 PCR 检测方法为病原菌的研究和病害的防治提供了新的思路。本 文对实时荧光定量 PCR 技术的原理，近年来检测蔬菜病原细菌方法的特异性、灵敏性及应用和发展前景 等方面进行了评述，为蔬菜病原细菌的研究和病害的防治提供理论基础和技术支撑。 关键词：实时荧光定量 PCR；蔬菜病原细菌；检测 中图分类号：S63　　文献标识码：A　　 文章编号： 1000-6346（2013）04-0001-05 Real-time Quantitative PCR Technology for Detecting Vegetable Bacterial Disease * CHEN Lu，XIE Xue-wen，SHI Yan-xia，LI Bao-ju Insititute of Vegetables and Flowers Chinese Academy of Agricultural Sciences Beijing 100081 China ） （ ， ， ， Abstract ：Real-time quantitative polymerase chain reaction （PCR） method offers new train of thoughts to study phytopathogenic pathogens and to control plant diseases timely．This paper expounds the theory of real-time quantitative PCR，its specificity，sensitivity，application in detecting vegetable bacterial diseases recently and prospects for development of real-time PCR．This paper has provided theoretical foundation and technical support for studying vegetable bacterial pathogens and diseases control. Key words ：Real-time quantitative PCR；Vegetable bacterial pathogen；Detection 蔬菜细菌性病害是由植物病原细菌引起的一类病害，具有侵染途径多样、传播速度快、防 治困难等特点，是蔬菜病害防治的重点。传统的病原细菌检测采用培养基分离纯化与致病性 鉴定的方法，随后血清学技术的应用使得病原细菌的快速检测成为可能（Schaad Frederick， 2002）。 Rasmussen 和 Wulff 于 1991 年 首 次 采 用 PCR 方 法 检 测 植 物 病 原 菌（Rasmussen Wulff， 1991）及感染种子（Prosen et al.，1991），推动基于 PCR 方法的植物病原菌检测技术快速发展。 20 世纪 90 年代中期发展起来的实时荧光定量 PCR 技术可以对靶标核酸进行精确定量检测，突 破了传统 PCR 技术只能对目标核酸进行定性检测的局限，因而受到越来越多的重视，现已被广 泛应用在植物病害诊断等不同的研究领域。近年来，多种蔬菜病原细菌的实时荧光定量 PCR 检 测方法先后建立，为蔬菜病原细菌的研究和病害的防治提供理论依据和技术支持。 收稿日期：2013-01-18；接受日期：2013-01-26 基金项目：大宗蔬菜产业技术体系建设专项（CARS-25） 作者简介：陈璐，女，硕士研究生，专业方向：植物病害防治，E-mail：329111848@ * 通讯作者（Corresponding author）：李宝聚，男，研究员，博士生导师，专业方向：蔬菜病害诊断与防治，E-mail： libaoju@ 《中国