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96 中国棉花学会2010年年会论文汇编
MFLP分子标记及其在棉花遗传育种中的应用前景
王永强。张寒霜，赵俊丽，郭娴
(河北省农林科学院棉花研究所，石家庄050051)
摘要：徼卫星锚定片段长度多态性(Microsatellite-anchoredfragmentlength
是结合了AFLP和SSR锚定引物技术发展而来的一种新型分子标记技术。本文对其起源、基本原
理、技术程序和应用范围及该技术在棉花研究中的应用前景进行了介绍和描述。
关键词：分子标记；MFLP
TheMicrosatellite-anchored andIts
Appli。
FragmentLengthPolymorphism
cation inCottonGeneticsand
Prospects Breeding
WANG Xian
Yong—qiang，ZHANGHan—shuang，ZHAOJun—li，GUO
Research and
(Cotton Institute，Hebei
AcademyofAgricultureForestry
050051，China)
combinesthe of
Abstract：Microsatellite-anchored concept
fragmentlengthpolymorphisms，which
AFLPandthemicrosatellite-anchor oneofthenewDNAmolecularmarkers
primertechnique，is
introducedthe of
techniques．Thispaper procedure
MFLPandforetellsits intheresearchofcotton．
application
prospect
words：molecularmarker；MFLP
Key
微卫星锚定片段长度多态性(Microsatellite-anchoredlength
fragment
型的DNA指纹技术。该技术具有多态性强，分辨率高，样品适用性广，易转化为特异性标记等特点，
在动植物指纹图谱构建、QTL定位、遗传多样性分析、分子标记辅助育种等方面具有巨大的开发潜力
和广阔的应用前景。
l MFI。P标记原理及技术流程
段，与AFLP不同的是MFLP是将基因组DNA进行单酶切后，连接专用接头，再进行酶切，从而形
成只有一端带有专用接头的限制性片段作为DNA扩增的模板，通过附带选择性碱基的专用接头引
物和SSR锚定引物进行两轮选择性扩增，利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增的DNA片段，经银
染或放射自显影便可进行多态性分析。
切：为减少干扰性条带和MseI—MseI片段的扩增，用高频剪切酶HaeⅢ将连接产物进一步进行酶切
择性扩增：预扩增产物稀释后进行选择性扩增，以3’端含有三个选择性碱基的MseI引物(首个碱基
与预选择扩增引物3’端碱基一致)及SSR锚锭引物(与预选择扩增相同)进行第二轮选择性PCR扩
增。(6)变性聚丙烯凝胶电泳分析：PCR产物变性后在含尿素的聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离，继而进
行多态性比较分析、特异片
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