从家兔早期胚胎分离ES细胞影响因素的研究.pdfVIP

第25卷增刊 物_科 学 2006年9月 Vol.Z5，Jup. and13iol.5c ence Sept.，2006 JJoTu`rnnaaAloffG撬uannggx}t-A9grIic. 文章编号:1008一3464(2006)增一0068-05 从家兔早期胚胎分离ES细胞影响因素的研究 曹君君’,2，王新庄 “，夏霞,“3，王轶敏，，牛晖’ (1华南农业大学兽医学院，广东广州510642;2 河南省肉牛工程技术研究中心，河南郑州450003; 3 河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002) 摘要:比较胚胎的不同处理方法，不同饲养层对兔胚胎内细胞团 ((ICM)贴壁和增殖的影响。结果显示: 消化掉外层粘蛋白和部分透明带的胚胎96h贴壁率 (85.2900,29/34)较高，内细胞团生长良好;超排组胚 胎的贴壁率和内细胞团 (ICM)原代克隆率与 自然发情组差异不显著 ((85.71Yvs88.06%,21.430ovs 19.40%,P0.05);与对照组 (12.5%,3.13%)相比，在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层 (MEF)和兔胚胎 成纤维细胞饲养层 ((REF)上培养获得的呈聚集状生长ICM及ICM原代克隆率较高 (P0.01),MEF组和 REF组差异不显著 (54.1%,22.95%vs51.920o,17.31%,P0.05)，但REF饲养层培养效果不稳定。研 究结果表明，兔早期胚胎消化掉外层粘蛋白和部分透明带有利于胚胎内细胞团贴壁和增殖;超排处理不影响 从兔胚中分离胚胎干细胞 ((ES);小鼠胚胎成纤维细胞饲养层能有效支持兔胚内细胞团的贴壁和增殖. 关键词:兔;胚胎;胚胎干细胞;内细胞团;体外培养 中图分类号:S852.1 文献标识码:A Researchonfactorsrelatedtoisolationofembryostemcells from primaryrabbitembryos CAOJun一jun1.2，WANGXin一zhuang,XIAXia3,WANGYi一min,NIUHui (1CollegeofAnimalMedicine,SouthChinaAgricultureUniversity,Guangzhou510642,China; 2 ResearchCenterofBeefEngineering,Zhengzhou450003,China; 3 CollegeofHusbandryandAnimalMedicineEngineering,HennanAgricultureUniversity,Zhengzhou450002,China) Abstract:Differenttreatmentsofrabbitblastocystanddifferentfeedlayerswereadoptedto comparetheeffectsonattachmentandreproductionofrabbitinnercellmass(ICM).Results:There washighrateofattachmentofblastocyststhatwereindigestedexternalmucoproteinandpartialzona pellucidain96hculture(85.290o，29/34)andgrowthofICMwasexcellent;therewasnotsignificant differenceinrateofattachmentandcloneofprimaryICMbetweensuperovulationgroupandcontrast group(85.71%vs88.06%，21.430ovs19.4000，P0.05);ratioofaggregatedICMandcloneof primaryICM onmouseembryonicfibroblast(MEF)an