探析超高效合相色谱技术测定中药黄芪中黄酮类化合物成分.docVIP

探析超高效合相色谱技术测定中药黄芪中黄酮类化合物成分 　　【摘要】 目的 探讨超高效合相色谱技术测定中药黄芪中黄酮类化合物成分的效果。方法 采用超高效合相色谱技术对中药黄芪中黄酮类化合物的成分进行测定， 选择色谱柱：Agilent Cu（250.0 mm×4.6 mm， 5 μm）；流速：1 ml/min；流动相：甲醛-水梯度洗脱；检测波长为254 mm；并选择适宜的温度。分析结果。结果 精密度实验检验结果良好， 且供试品溶液的稳定性和重复性良好， 其中算出对照品面积的RSD分别为2.5%、1.7%、1.5%、2.2%、1.8%、1.6%。结论 应用超高效合相色谱技术测定中药黄芪中黄酮类化合物的成分效果显著， 操作简便， 精确度高， 具有较强的可靠性， 是理想的测定中药黄芪中黄酮类化合物的成分方式， 值得推广 【关键词】 超高效合相色谱技术；中药黄芪中黄酮类；化合物；成分 DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.04.095 中药黄芪中黄酮类化合物的成分主要包括防风、黄氏、白术， 这些中药均为临床上治疗反复上呼吸道感染的经典药方， 其具有很好是免疫调节作用。目前， 有研究表明药理学中的黄芪中黄酮类化合物成分可大大降低患者大脑动脉栓塞率， 而且还能有效增加缺血组织抗痒化酶的水平。本文作者经过建立一组超高效合相色谱技术对中药黄芪中黄酮类化合物的成分进行检测定， 现将具体内容报告如下 1 ?x器与材料 1. 1 仪器 采用Agilent1200高效的液相仪， 系列四元梯度汞、自动进样器， 并选择二极管阵列检测器， 便于检测DAD， 然后选择天津四友化学试剂公司生产的甲醇试剂；中国药品生物制品检定所制造的黄氏甲苷对照品试剂；双蒸水；超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司， KQ-400KDE）；电子分析天平（Mettler公司， AB135-S） 1. 2 材料 色谱纯包括甲醇、乙腈、异丙醇， 而水为超纯水， 对照品槲皮素、芒柄花素、山奈酚、芒柄花苷都是来自于中国药品生物制品检定所。甘肃和陕西产的膜荚黄氏的干燥根， 还有中国医学科学院药用植物研究所教授鉴定内蒙古产为豆科植物蒙古黄氏的干燥根， 毛蕊异黄酮苷是购自于北京恒元启天化工技术研究院， 而且纯度质量分数一般98% 2 方法与结果 2. 1 精密度实验 选取混合对照品储备液， 根据色谱的条件进行重复性是进样约6次， 然后分别计算毛蕊异黄酮苷、槲皮素、山奈酚、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花峰的面积， 且每次进样2 μl测定， 结果表明此方法的精密度检验较好， 毛蕊异黄酮苷、槲皮素、山奈酚、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花峰的面积分别为1.63%、1.74%、1.45%、1.50%、0.98%、1.26% 2. 2 色谱的条件 色谱柱Agilent Cu（250.0 mm×4.6 mm， 5 μm）；流速为1 ml/min， 进样量为2 μl；流动相A为甲醛水0.1%， 流动相B为7∶3的甲酸乙腈-异丙醇梯度洗脱0.1%；检测波长为254 mm；柱温约为30℃ 2. 3 对照组品溶液与供试品溶液的制备 分别给予对照品毛蕊异黄酮苷、槲皮素、山奈酚、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花峰精密称取1.3、1.5、1.4、1.5、1.4、1.4 mg， 然后放置于1 ml的量瓶中， 再加入甲醛到刻度尺寸高度， 且摇匀使其混合， 接着配制成混合性的对照品储备液。对于供试品溶液的制备， 首先选取大约2.0 g的药材粉末， 同样精密称定， 然后放置于具塞锥形瓶里， 再加入25 ml的甲醇， 并冷制温室中保存， 超声40 min。当过滤到25 ml量的瓶子中时， 可适当加入甲醇到规定的刻度， 经过0.22 μm的微孔虑膜过滤， 随后摇匀， 最后再次取续滤液， 即可完成供试品溶液的制备 2. 4 稳定性实验 在操作稳定性实验的过程中， 应按照供试品溶液的制备， 在温室下测定0、2、4、6、8、12、24 h供试品溶液的稳定性情况。然后以峰面积为指标对毛蕊异黄酮苷、槲皮素、山奈酚、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素的RSD进行测定， 结果测得出以上对照品的RSD分别为2.3%、1.7%、1.6%、1.5%、1.9%、2.1%， 以上数据充分说明了供试品溶液在24 h内的稳定性较好 2. 5 重复性考察 针对供试品溶液的制备进行考察， 首先选取2.0 g的黄氏粉末， 同样按照供试品溶液的制备然后平行制备6份的供试品溶液， 并在色谱条件下分析其考察效果。然后计算出毛蕊异黄酮苷、槲皮素、山奈酚、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花峰面积的RSD， 结果计算出其面积RSD分别为2.5%、1.7%、1.5%、2.2%、1.8%、1.6%， 以上数据表明了供试品