理02专题3课题2分析.pptx

植物的组织培养技术 专题三 课题2　月季的花药培养 1.说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。 2．说出影响花药培养的因素。 3．掌握选取适宜的培养材料和培养基。(重、难点) 4．学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 1．花粉的概念：由花粉母细胞经过_____分裂形成的单倍体的生殖细胞。 2．发育过程 （1）四分体时期：4个单倍体细胞连在一起。 （2）单核期：细胞含有浓厚的_______，该期又可分为____________和单核靠边期两个时期。 （3）双核期：细胞中含有______细胞核和______细胞核，它们分别形成一个营养细胞和一个生殖细胞，其中的生殖细胞形成两个精子。 减数 原生质 单核居中期 生殖 花粉管 一、被子植物的花粉发育 思考感悟 1．被子植物花粉发育过程中的四分体时期与减数分裂过程中的四分体时期是同一阶段吗？ 【提示】　不是同一阶段。前者的四分体时期是指4个单倍体细胞连在一起的时期；后者的四分体时期是指同源染色体配对后，一对同源染色体含有四条染色单体的阶段。 1．途径差异：一种是花粉通过________阶段发育为植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成__________，再将其诱导分化成植株。 2．形成原因：主要取决于培养基中_______的种类及其浓度配比。 3．花粉植株的特点：________植株，植株弱小，__________。 胚状体 愈伤组织 激素 单倍体 高度不育 二、产生花粉植株的两种途径 思考感悟 2．花粉植株弱小，高度不育，是否就没有利用价值？ 【提示】　尽管花粉植株弱小，高度不育，但可以利用其进行单倍体育种，能够明显缩短育种周期。 主要受材料的选择与______________的影响。一般说来，选择_____期的花药培养成功率最高。 培养基的组成 单核 三、影响花药培养的因素 1．材料的选择 (1)不同种类植物的诱导成功率不同。 (2)同一种植物，生理状况对诱导成功率也有直接影响。 (3)适合的花粉发育时期：花期早期(即初花期)时的花药最佳。 (4)选择最合适的花粉发育时期：单核期。 ①不选择单核期以前花药的原因：此时花药质地幼嫩，极易破碎。 ②不选择单核期以后花药的原因：花瓣已有些松动，给材料的消毒带来困难。 ③挑选单核期花药的方法：通常选择完全未开放的花蕾。 四、实验操作 1．取材 (1)材料的选取：对绝大多数植物而言，适宜花粉培养的时期是__________。 (2)花药发育时期的确定：一般通过_____来确定花粉是否处于适宜的发育期。 (3)镜检方法：最常用的是___________法。但某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青—铬矾法。 花期早期 镜检 醋酸洋红 2．消毒 常用消毒液为_______________和0.1%的氯化汞溶液，消毒时间分别为30 s和2～4 min。 70%的酒精 (3)培养：温度为________℃，幼苗形成之前________光照。培养20～30d后，花药开裂，长出________或释放出________。前者还要转移到______________上进行分化培养成再生植株；后者要尽快分开并转移到新的培养基上。 (4)鉴定和筛选：通过愈伤组织形成的植株，常常会出现____________的变化，因而需要鉴定和筛选。 3．接种和培养 (1)剥取花药：消毒后的花蕾，要在________条件下除去花萼、花瓣。剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是______________________________；二是要彻底除去花丝，原因是花丝不利于__________________的形成。 (2)接种花药：剥取的花药要立即接种到培养基上。每个培养瓶接种________个花药。 无菌 容易从受伤部位产生愈伤组织 愈伤组织或胚状体 7～10 25 不需要 愈伤组织 胚状体 分化培养基 染色体倍性 思考感悟 3．花药长出愈伤组织或释放胚状体后，如何进一步处理？ 【提示】　(1)花药长出愈伤组织后，要将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。 (2)花药开裂释放出胚状体后，要尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。 7 (1)水、无机盐　(2)细胞分裂素　生长素 (3)叶绿素的形成需要光，试管苗的生长发育所需营养来自叶绿体　利用光能制造有机物 (4)24　(5)AB、Ab、AB、ab 8 (1)生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化　单核　醋酸洋红法 (2)胚状体　(3)D (4)灭菌　煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法、化学试剂消毒法 9 (1)AB、Ab、aB、ab　AB、Ab、aB、ab　单倍体　减数分