冲洗(洗涤)-常规石蜡切片制作.doc

第六节 组织的冲洗（洗涤） 用水或乙醇 等将组织经过固定处理后，未与组织结合的固定液及沉淀物清洗掉的过程，称为洗涤。 1. 洗涤的目的 洗涤的目的使为了去掉未与组织结合的固定液及沉淀物。组织脱水前需要用流水冲洗笃定后的组织块（使用特殊固定液除外），避免组织中留有较多的固定液而妨碍脱水，甚至在组织中生成沉淀物或结晶而影响染色和观察。对陈旧性标本应注意，一定要用流水彻底冲洗，尽可能降低组织的酸性程度，并减少甲醛色素。对使用混合固定液固定的组织更应及时冲洗，不可搁置太久，以有利于后续各程序的进行。 2. 洗涤的方法 （1）含水 固定液的洗涤方法 常用的含水固定液是甲醛溶液，用自来水冲洗即可。冲洗时将组织块放入广口瓶中，瓶口罩纱布并用线系牢，置于接有橡皮管的自来水龙头下，橡皮管的另一端插入瓶内，让水从瓶底向上缓慢流出而更新。水洗时水流速度不能快，以免冲坏组织的完整性。水洗时间取决于标本种类、组织块大小、固定时间等。尸检组织、大块组织水洗时间约为4h，小块组织冲洗时间为2－4h。固定时间短的新鲜标本，可缩短水洗时间。固定时间较长的组织，则需要长时间流水冲洗。对穿刺组织、脑等细小易碎的组织，为不损坏组织，以浸泡方式洗涤为宜，浸泡时应反复多次换水，浸泡时间应根据具体情况而定。 （2）含乙醇固定液的洗涤方法 用乙醇或乙醇混合液固定的组织，一般不需要洗涤。如果需要洗涤，应使用与固定液中的乙醇浓度相近或略低的乙醇洗涤，不可用浓度相差太大的乙醇冲洗，也不能直接用水冲洗。 （3）特殊固定液的洗涤方法 使用的固定液不同，洗涤的方法也不一样。 铬酸、锇酸固定液，用流水冲洗12－24h，应注意洗涤干净，否则也影响染色。 重铬酸钾固定液，用流水冲洗12－24h，或用亚硫酸钠溶液冲洗，也可用1％的氨水溶液洗涤。 苦味酸固定液，无论是乙醇溶液或水溶液，都应用流水彻底冲洗，并用50％或70％乙醇浸洗，以洗掉组织内苦味酸所留的黄色。浸洗时可将少量碳酸锂饱和水溶液滴入乙醇中，直至乙醇不变色为止。 氯化汞固定液，含氯化汞固定液固定的组织，常常形成菱形结晶（氯化亚汞）或不规则的物质（金属汞），使组织变脆，影响制片和染色质量，因此，必须进行脱汞处理，以除去含汞的沉淀物。具体方法：组织用自来水冲洗后放入70％或80％的乙醇中洗涤，洗涤时滴入0.5％碘酒（用70％乙醇配制），待棕色消失后继续冲洗，直至脱汞乙醇无色。最后用5％硫代硫酸钠水溶液脱碘。 组织经过固定后，脱水之前应进行冲洗，将组织内的固定液洗干净，否则残留组织内的固定液有碍制片和染色，而有些固定液则可在组织中继续起到脆化组织的作用，以至于损坏组织，给制片工作带来不利。在冲洗时，冲洗剂的选择应依固定液的种类和性质而有所不同。 冲洗时应注意以下事项： 水溶性的固定剂：需用流水冲洗。 酒精溶剂的固定剂：应用同浓度的酒精浸洗。 含苦味酸的固定剂：（苦味酸与甲醛混合液除外），须用70％酒精浸洗，以免水洗后固定作用消失。 含有升汞固定剂：组织经固定后应在冲洗剂－水或酒精中加碘以洗去组织内汞的沉淀。 含有铬酸的固定剂：组织在冲洗时最好置于暗处，以免产生沉淀或使组织硬化而影响制片。