医院感染微生物学-培训课件.ppt

环境类别 范 围 标 准 空 气 （cfu/m3 ） 物体表面(cfu/cm2) 医护人员手(cfu/cm2) Ⅰ类 层流洁净手术室、层流洁净病房 ≤10 ≤5 ≤5 Ⅱ 普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室灭菌间、烧伤病房、重症监护病房 ≤200 ≤5 ≤5 Ⅲ 儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、供应室洁净区、急诊室、化验室、普通病房。 ≤500 ≤10 ≤10 Ⅳ 传染科及病房 --- ≤15 ≤15 医护人员手样细菌总数测定 采样时间：在接触病人前或从事医疗活动前进行采样 六步洗手法 采样方法： 被检人五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30 cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手接触部位,将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检. 操作：将样品管充分混合后，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品 接种于灭菌培养皿中（共接种2只平皿，做平行样），加入熔化的450C灭菌营养琼脂15ml混合后，待其凝固，翻转平板置370C培养48h作菌落计数。 结果计算 N×稀释倍数 细菌总数(cfu/cm2)= 面积（cm2） N——平均菌落数 ×10——换算成10ml， ÷60——30cm2/手 卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/ cm2。 外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/cm2 物体表面的监测 采样时间 消毒处理后4h内进行采样 采样方法： 棉拭子采样法 涂抹法 物体表面的监测 拭子采样法： 采样面积：被采表面＜100cm2 时,取全部表面；被采表面100cm2时,取100cm2。 采样方法：用5×5cm2的标准灭菌规格板，放在被检物体表面。用浸有含相应中和剂的无菌采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1～4个规格板面积，剪去或折去手接触部份，棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检，门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样 物体表面的监测 检测方法： 将采样管在混匀器上振荡20s或用力振摇80次，用无菌吸管吸取1.0ml接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的45～480C的营养琼脂15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置36℃±1℃温箱培养48小时，计数菌落数。 物体表面的监测 结果报告（菌落总数） 计算公式： 物体表面细菌菌落总数(cfu/cm2)= 其中小件物品以cfu/件报告结果 平皿上菌落的平均数x稀释倍数 采样面积(cm2 ) 洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/ cm2。 儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/ cm2。 使用中消毒液细菌总数监测 采样方法： 用无菌吸管吸取1.0ml待检样品，在无菌条件下加入9.0ml含相应中和剂的采样液中混合后送实验室检验（采样液可以用N.S代）。 ：将样品管充分混合后，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品 接种于灭菌培养皿中（共接种2只平皿，做平行样），加入熔化的40-45 ℃灭菌营养琼脂15ml混合后，待其凝固，翻转平板置37 ℃培养48-72h作菌落计数。 醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和，含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂，洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂，醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂，含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%；也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂 结果计算 细菌总数(cfu/ml)=N×10 N——平均菌落数 ×10——换算成10ml，即1ml采样量，结果按每ml报告。 消毒液染菌量（cfu/ml）=平均每皿菌落数×10×稀释倍数 结果判断 使用中灭菌用消毒液：无菌生长； 使用中皮肤黏膜消毒液染菌量：≤10cfu/ml， 其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml。 压力蒸汽灭菌效果的监测 方法: 物理监测法、化学监测法、生物监测法和B—