参麦注射液对急性缺血再灌注大鼠心肌细胞抗氧化能力的研究论文.docVIP

　　参麦注射液对急性缺血再灌注大鼠心肌细胞抗氧化能力的研究论文 .freelyocytes after acute ischemia-reperfusion in rats 【Abstract】 Objective To observe the effect of Shenma injection on antioxidative ability of cardiomyocytes after acute ischemia-reperfusion in rats.Methods The ischemia-reperfusion heart model yocardium and CK activity of serum ined.Results The activitie of cNOS， GSH-Px，SOD a group as pared ia-reperfusion group (P 0.01). CK，iNOS activity and MDA content a group.Conclusion The results suggested that the protected effects of Shenma injection on the myocardial ischemia-reperfusion injury may be reiated to its actlon of scaverging the oxygen free radicals，protecting the antioxygen free radical enzymes and inhibiting the lipid peroxidation in the myocaydium. 【Key a injection；ischemia-reperfusion；NOS；GSH-Px；SOD；MAD；CK 冠状动脉缺血引起缺血性心脏病是心血管系统疾病的主要死亡原因，临床治疗主要是解除冠脉痉挛，恢复血流供应，这又使心脏经历一个缺血后恢复灌流的过程 ， 有可能引起细胞死亡或进一步功能障碍。设法解除或减轻再灌注损伤成为此类心脏病防治研究的重点。临床研究已证实［1］参麦注射液(Shenma injection，SM) 能减轻急性心肌梗死患者溶栓后再灌注损伤，本实验通过结扎/松解左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注模型，以心肌组织cNOS、iNOS、GSH-Px、SOD、MAD及血清CK的水平变化反映心肌受损程度，并用SM干预，探讨SM抗心肌细胞脂质过氧化的作用机制，以此为中医药防治缺血再灌注损伤的应用，加强心肌保护提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 材料和动物分组 1.1.1 实验仪器和试剂 ECG-6511型心电图仪（上海医疗器械厂）； TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；数显恒温水浴锅（金坛市富华仪器有限公司）；结构型、诱导型一氧化氮合酶（cNOS，iNOS）、脂质过氧化物丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）双缩脲法蛋白定量试剂盒（南京建成生物工程研究所），肌酸激酶（CK）试剂盒（北京化工二厂）；参麦注射液(SM杭州正大青春宝药业有限公司）。 1.1.2 实验动物及分组采用健康成年I）组、缺血再灌注（MI/R）组、参麦（SM）组，每组6只。 1.2 动物模型的制作 20%乌拉坦腹腔注射麻醉（7ml/kg），用针形电极插入四肢皮下，观察记录标准肢体Ⅱ导联心电图。气管切开，呼吸机人工呼吸，呼吸频率80次/min，开胸暴露心脏，于左心耳下缘约1mm处用6号医用缝针和0号医用缝线穿过心肌浅层作一结扎线，稳定10min左右行实验处理。各组手术步骤：Sham组：穿线不结扎，旷置25h；MI组：在穿线间置宽3mm橡皮条，双活结结扎左冠状动脉前降支，以心电图S-T段明显上抬，结扎线以下心肌颜色变暗为心肌缺血标志，缺血30min；MI/R组：如缺血30min方法处理，缺血30min后松开结扎线，恢复再灌注120min；SM组：在结扎左冠状动脉前降支前3天，每日腹腔注射2ml（含参麦0.4g）参麦注射液，而后处理同缺血再灌注组。以上各组动物实验完毕，摘除眼球采血备检，同时摘取心脏。 1.3 标本采集及检测方法 1.3.1 CK的检测 上述各组动物摘除眼球采血1ml后立即置入加有20μ1EDTANa2和10μl抑肽酶的预冷离心管内充分混匀、4℃下3500r/min，离心5min，吸取管内上清液密封后于-20℃低温冰箱保存待测。 1.3.2 cNOS、iNOS、GSH-Px、SOD、MDA的检测实验完毕，摘除部分结扎线以下左心