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聚赖氨酸研究进展精要
报告人:;目录;一 前言;;二 聚赖氨酸概述;2 聚赖氨酸的生物学性质
;3 聚赖氨酸的功能和作用;4 ε-聚赖氨酸测定方法;
传统研究认为,食品防腐剂的作用机理主要表现在如下3个方面:
(1) 作用于细胞壁和细胞膜系统;
(2) 作用于遗传物质或遗传微粒结构;
(3) 作用于酶或功能蛋白。
;
Shima S[3]等研究发现,防腐剂主要抑制微生物的呼吸作用,导致能量物质ATP和还原物质NADH亏缺,所有合成代谢受阻,活性的动态膜结构不能维持,代谢方向趋于水解,最后产生细胞自溶。
1983年,Vaara M[4]等发现聚阳离子能破坏G- 细菌的外膜,并进一步杀死这些细菌。
1992年Vaara M[5]进一步发现,聚赖氨酸是通过吸附到G- 细菌的外膜上,释放出大量的脂多糖,破坏细菌外膜,而起到抑菌作用的。
;6 聚赖氨酸的生产方法;7 ε-聚赖氨酸产生菌的筛选; 之前,世界赖氨酸市场主要由日本味之素公司、美国ADM公司、德国巴斯夫公司、日本协和发酵公司和韩国希杰公司等控制,目前,日本年产数千吨左右,在满足国内食品行业大量需求外,产品还销往美国、欧洲、韩国等国家。近年来,我国的赖氨酸生产企业迅速崛起,在世界竞争中占据了一席之地。
;四 聚赖氨酸的国内外研究进展;聚赖氨酸的国内研究进展;五 聚赖氨酸的发酵工艺优化:;国内 ε-聚赖氨酸发酵工艺优化;2010 年,张扬[13]等利用丝瓜囊对 ε-PL 产生菌进行固定化培养,实现了菌体的重复利用,同时使得 ε-PL 产量达 34.1 g/L,日产率达9.34 (L·d)。
董难[17]等人从碳源和氮源补料方式的优化入手,建立了流加谷氨酸发酵策略和补料酵母粉发酵策略。在发酵过程中流加谷氨酸 174 h 实现 ε-PL 产量达到了 31.65 g/L,比对照的 ε-PL 产量(21.22 g/L)提高了 49.2%。
2010年,陈旭升[14] 通过研究碳源和氮源流加方式对 ε-聚赖氨酸补料-分批发酵过程的影响,将补料阶段甘油浓度稳定控制在 0 ~10 g/L,并在发酵 96 h 开始流加酵母粉和( NH4)2SO4混合液,结合 pH 值 2阶段调控策略( 3. 5→3. 8) ,经过192 h 发酵,可以实现 ε-PL 产量达到38. 77 g/L,产率达到4. 85 g/( L·d)。
;许召贤[18]等通过在培养基中添加 0.5%的正十二烷来提高溶解氧,从而达到提高ε-聚赖氨酸产量的目的,168 h,产量达到30.8 g/L。
周永鹏[19]等通过对出发菌株进行原生质体融合,得到一株重组菌株F4-22,在5 L酵罐中发酵163 h,产量达到了39.96 g/L,比菌株M-Z18(30.11 g/L)提高了32.7%。
孙启星[20]等通过在线监控pH的基础上,通过种子阶段孢子预处理与接种量的优化,在5 L发酵罐中发酵186 h,产量达到48.9 g/L。在50 L 发酵罐中发酵186 h,产量达到了36.22 g/L。;任喜东[21,22,23]等利用农副产品生产ε-聚赖氨酸,产量达到了35.24 g/L。随后又采用在补料分批发酵中酸性pH冲击策略使产量提高至54.7 g/L,并对其产ε-聚赖氨酸反应机理进行研究。
曾昕[24]等研究了葡萄糖和甘油作为混合碳源时对于提高ε-聚赖氨酸产量的作用,表明混合碳源可以加速细胞的生长以及代谢产物的合成,从而提高ε-聚赖氨酸的生产率。;六 ε-PL分离与提取工艺优化;2 ε-PL 提取工艺路线的初步建立; ε-PL 各项参数指标:;参考文献:
[1] Itzhaki R F. Colorimetric method for estimating polylysine and polyarginine[J]. Analytical biochemistry, 1972, 50(2): 569-574.
[2] Kahar P, Iwata T, Hiraki J, et al. Enhancement of ε-polylysine production by Streptomyces albulus strain 410 using pH control. J Biosci Bioeng, 2001, 91:190-194.
[3] Shima S, MATSUOKA H, IWAMOTO T, et al. Antimicrobial action of. EPSILON.-poly-L-lysine[J]. The Journal of antibiotics, 1984, 37(11): 1449-1455.
[4] Vaara M, Vaara T. Polycations sensitize enter
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