半胱氨酸修饰金电极电化学发光法测定罗红霉素论文.docVIP

　　半胱氨酸修饰金电极电化学发光法测定罗红霉素论文 【摘要】 在裸金电极上制备了L半胱氨酸自组装膜修饰电极(LCysAu/SAM/CME)。考察了联吡啶钌和罗红霉素在此修饰电极上的电化学及其发光行为。结果表明，此修饰电极表现出了很好的电化学活性和电化学发光(ECL)响应。基于罗红霉素的存在可增大了联吡啶钌的发光强度，建立了测定罗红霉素片的电化学发光分析方法。在最佳实验条件下,罗红霉素浓度在1.0×10-7～1.0×10-4 mol/L范围内与其相对发光强度呈线性关系，其线性回归方程为I=2×107C+384.02， r=0.9977; 检出限(S/N=3)为1.0×10-7 mol/L。连续测定1.8×10-5 mol/L罗红霉素10次，发光强度的RSD为1.93% , 表明此修饰电极具有较好的重现性,并将本方法用于罗红霉素片剂的检测。 【关键词】 L半胱氨酸， 化学修饰电极， 罗红霉素.freelol/L范围内呈良好的线性关系。本方法简单、线性范围宽、检出限低，同时具有较高的选择性，样品处理简单。本方法应用于罗红霉素片剂的分析，结果满意。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 MPIE型电致化学发光分析系统(西安瑞迈电子科技有限公司); DL60D型超声波清洗器(上海之信仪器有限公司)， CH660B电化学工作站(上海辰华仪器有限公司); 电化学实验采用三电极系统: LCysAu/SAM/CME电极为工作电极， Pt丝为对电极，Ag/AgCl为参比电极(饱和KCl溶液)。 1.00×10-4 mol/L罗红霉素标准储备液(用时现配)：准确称取0.0084 g 罗红霉素(中国药品生物制品检定所)，用20 mL无水乙醇溶解后，用水定容至100 mL棕色容量瓶中，再用超声脱气后冷藏于冰箱中备用; 1.00×10-3 mol/L联吡啶钌(Aldrich公司)储备液：准确称取六水合三(2，2联吡啶)氯化钌0.0374 g，用水溶解并定容于50 mL棕色容量瓶中，用超声脱气后放入冰箱中(4 ℃)保存。实验用水均为二次石英亚沸蒸馏水。 2.2 LCysAu/SAM/CME的制备 将金电极首先用金相砂纸打磨，再依次用0.5和0.05 μm αA12O3粉在平板玻璃上抛光至镜面，分别于无水乙醇和水中超声洗涤5 min。然后将金电极浸人0.05 mol/L H2SO4 溶液10 min，在1.4～0.4 V范围内进行CV扫描，直至得到稳定和重现的伏安图。随后，固定电位在0.25 V恒电位极化3 min，以彻底消除表面可能存在的金氧化物。再将金电极依次用水和无水乙醇冲洗干净，以高纯氮吹干立即浸入0.02 mmol/L LCys溶液中，在室温下自组装24 h，取出电极，用无水乙醇反复冲洗以除去物理吸附的硫醇，最后用水冲洗，即可制得LCysAu/SAM/CME。 2.3 实验方法 实验在MPIE型电致ECL工作站上进行。三电极系统; 支持电解质为0.1 mol/L 硼酸盐缓冲液(pH 7.50)，将0.4 mmol/L Ru(bpy)2+3和0.2 mL 0.1 mol/L硼酸盐缓冲液加入电解池，在0.2～1.30 V范围内进行CV扫描，然后记录发光信号作为空白。在上述溶液中加入一定浓度的罗红霉素溶液0.1 mL, 采用相同的方法测定发光信号值。以相对化学发光强度(信号/空白)对罗红霉素定量分析，绘制相对峰高强度与罗红霉素浓度的校准曲线，同时对样品进行分析测定。 a. 2.5 mmol/L Ru(bpy)2+3;b. a+0.1 mmol/L 罗红霉素(Roxithromycin) 0.1 mol/L Na2B4O7。发光强度时间实验曲线由MPIE型ECL工作站测定。用工作站检测池下方的光电倍增管来收集待测样品的ECL强度，光电倍增管负高压为850 V。溶液测定前用超声波除气5 min,实验在室温下进行，所有电位值均相对于参比电极Ag/AgCl。 3 结果与讨论 3.1 Ru(bpy)2+3和罗红霉素的电化学行为 分别对80 μL Ru(bpy)2+3，80 μL硼酸盐缓冲溶液(pH 7.5)，80 μL Ru(bpy)2+3+100 μL罗红霉素标准液+80 μL硼酸盐缓冲溶液(pH 7.5)进行CV扫描和正向线性电位扫描。实验结果如图2。图2的a和b分别为联吡啶钌体系和罗红霉素与联吡啶钌共存体系的CV曲线，从图2可见，联吡啶钌只有低的电极电流(曲线a)，而罗红霉素加入后电极电流信号显著增强(曲线b)，由此可知罗红霉素对联吡啶钌的电化学发光有显著的增强作用。 3.2 罗红霉素Ru(bpy)2+3体系电化学发光行为 考察了Ru(bpy)2+3在LCysAu/SAM/CME电极的EC