多发性骨髓瘤相关抗原的免疫学筛选及生物信息学分析论文.docVIP

　　多发性骨髓瘤相关抗原的免疫学筛选及生物信息学分析论文 .freelmunological Screening for Multiple Myeloma-Associated Antigens and Their Bioinformatics Analysis Abstract This study ed to screen the cell cDNA expression library of multiple myeloma HMy2 (MM HMy2) by using “serological analysis of cDNA expression library (SEREX)” technique.The obtained 30 positive clones ent search tool).The results indicated that 6 knoethyltrasferase etc.have been demonstrated a certain relationship or’s formation，progress and prognosis.The structures and functions of the neinarily analyzed and predicted by means of bioinformatics shoino acid residues respectively had the full open reading frames (ORF).All the neight be located at euchromosomes but MMSA-1 at sex chromosome.MMSA-4 ilar to the protein controlling the transcription of tumor antigen，MMSA-5 might take part in cell phagocytosis，MMSA-7 might inactivated NF-κB，and MMSA-12 might be a lymphocytic cytoplasmic protein.The specificity of neinary analysis using CrELISA.It is concluded that tumor antigens screened by this study can be used for early immunological diagnosis，surveillance of minor residual foci，assessment of prognosis，and preparation of tumor vaccine and so on. Key ultiple myeloma; tumor antigen; SEREX; bioinformatics 多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是一种克隆增殖型浆细胞疾病。由于瘤细胞增殖的比例低及多药耐药，虽然高剂量化疗后给予自体移植有效提高了缓解率，但MM的平均生存期仍仅有3-4年［1-3］。因此，新的治疗手段的研究和开发就显得极为重要。随着肿瘤生物治疗的发展，肿瘤疫苗近年来颇受重视［4，5］。建立MM 免疫治疗及制备MM 疫苗的一个重要前提是要有可作为靶向的肿瘤抗原。筛选鉴定肿瘤抗原的方法主要有两大类：一类是Ｔ细胞克隆技术，一类是“重组表达型cDNA文库的血清学分析法（SEREX）”技术［6］。在过去的几年中，SEREX 已被应用于多种肿瘤包括黑色素瘤、肝癌、肺癌、乳腺癌等的抗原研究中，并发现了超过2 000余种新抗原，且用SEREX法筛选出的很多肿瘤抗原已被证实与“CTL筛选法”所得的抗原是同一种抗原，能够激发机体产生出肿瘤特异性CTL反应。因此，我们采用SEREX技术筛选了骨髓瘤HMy2 细胞cDNA 表达文库，并对阳性克隆进行测序和生物信息学分析，现报道如下。 材料和方法 材料 骨髓瘤HMy2 细胞cDNA表达文库为陈刚博士构建，参见文献7］；生物素化绵羊抗人IgG（H+L）和碱性磷酸酶标记链亲和素（avindin-AP）均购自S-ABC公司； DMF、显色剂NBT／BCIP购自Amersco公司；NC膜购自Osmonics公司；质粒提取试剂盒购自华舜公司；Xhol Ⅰ/EcoRⅠ内切酶购自Life Science公司；蛋白水解酶抑制剂（AEBSF）购自Roche公司，HEPES购自S-ABC公司，OPD购自Amersco公司。所有的血清均从常规医疗诊断过程中得到，贮存于-80℃冰箱中备用，其中正常人30例，急性白血病M2型 6