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骨 髓 检 验(Bone Marrow Examination) 临检教研室 一、临床应用 1.用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情监控、疗效观察 如：白血病、再障、巨幼贫血、血小板减少性紫癜的诊断；缺铁性贫血的辅助诊断 2.用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断 如：原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿等。 适应征： ①原因不明的发热、恶病质； ②原因不明的肝、脾、淋巴结肿大； ③原因不明的外周血细胞数量、形态、种类异常 ④疑血液寄生虫感染 禁忌征： 血友病患者、妊娠中晚期患者 骨髓检查 骨髓细胞学检查 骨髓活检 细胞形态学检查 细胞表面抗原检查 细胞遗传学分析 骨穿部位：髂前、髂后上棘；胸骨等 抽取髓液量：≤0.2ml 送检要求：髓片≥3张，并送血片2张； 详细填写骨髓检查申请单 二、标本采集与送检 骨髓穿刺术录像 三、血细胞分化发育体系及规律 1. 发育体系 原免疫细胞 全能造血干细胞 髓系造血干细胞 淋巴系造血干细胞 红系祖细胞 粒-单系祖细胞 巨核系祖细胞 红细胞 B淋巴细胞 B淋巴系祖细胞 T淋巴系祖细胞 N、E、B、M 血小板 T淋巴细胞 浆细胞 颗粒：无→有，非特异性→特异性 核仁： 有→无 2. 发育规律 四、骨髓细胞形态学检查程序 1. 观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况 取材满意的标准：骨髓小粒、脂肪滴、骨髓特有细胞 2. 判断骨髓增生程度 共分五级；按照成熟红细胞与有核细胞的比 3. 观察计数巨核细胞 4. 观察片尾及边缘有无特殊细胞 （一）低倍镜检查 1.粒红比值（G:E）： 骨髓中，粒系与红系所占百分比的比值 分类计数200 ～ 500个有核细胞（巨核细胞除外），并观察其形态、注意有无其它特殊细胞及寄生虫。 （二）油镜检查 （三）计算、分析、诊断、书写报告 2.正常成人骨髓像特点 五、常用血细胞化学染色 1.过氧化物酶(peroxidase，POX)染色 用途：鉴别急性淋巴系与非淋巴系白血病 结果：粒系(+)；单核系(±)； 淋巴系(–) 原粒 单核 淋巴 早幼 晚幼 中幼 2.中性粒细胞碱性磷酸酶染色(neutrophil alkaline phosphatase，NAP) 鉴别：类白血病反应NAP↑ ，慢粒NAP↓ 化脓感染NAP↑， 病毒感染NAP↓ 3. 非特异性脂酶染色 α-醋酸萘酚酯酶（α- NAE）  ( non specific esterase，NSE ) 用途：鉴别急粒与急单 结果：粒系（-）或 弱（+）不被NaF抑制 单核系(+++) ，可被NaF抑制 细胞外铁 细胞内铁 4. 铁染色（ iron staining） 缺铁性贫血（外铁消失） 铁粒幼细胞贫血 用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断 缺铁性贫血：内、外铁均减少 铁粒幼细胞贫血：内、外铁均增多 MA、HA、AA、地中海贫血：外铁轻度增多 六、细胞免疫分型 （一）临床应用: 2.用于白血病微小残留病的检测 （二）急性白血病细胞免疫表型（表格） 1.有利于识别不同 系列 种类 亚群 分化阶段 功能状态 的细胞 2.慢性粒细胞白血病（CGL，CML） 95%以上可出现Ph染色体 核形：46，XY，t ( 9 ; 22 )，(q34，q11) （abl / bcr 融合基因） 七、细胞染色体基因分析 1.急性早幼粒细胞白血病（M3） 核形：46, XX, t (15 ; 17) , (q22 , q12) RARα – PML易位（阳性率90%以上） （维甲酸α受体基因—早幼粒细胞白血病基因） 骨髓细胞学检验： 临床应用 标本采集 方法、原理 参考值 临床意义 （常见血液病的血液学特点） 一、贫血的骨髓象特征 病因：铁缺乏，Hb生成不足、细胞质发育滞后 →推测幼红细胞形态：核老浆幼 (核染色质聚集度高，深染；胞浆少而蓝，边缘不整) → 幼红细胞成熟时间延长 → 在骨髓滞留时间长 → 比例增高 → 增生性贫血 →推测骨髓增生程度：活跃 或 明显活跃 (一) 缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA） 红系比例：＞20%，以中幼阶段增生为主， G:E 成熟RBC：小细胞低色素 铁染色： 病例一： 某女性菜农，近期阵发性咳嗽、心慌，偶尔腹泻、排黑便。检体见贫血貌，心率稍快，腹部有轻微压痛，余阴性。 RBC 3.4×1012/L，Hb 82g/L，WBC 8.2×109/L，Nsg 52%，E 18%，L 30%。RBC大小不均，