外操作及现察曲条件这项技术不仅对探索受精的奥.pdfVIP

堡 _(2塑 一塑 ～·5l一一 猪卵母细胞体外成熟与体外受精的研究 南京农业大学动物繁殖研究室 牛树理 冯紫云 邓满齐 南京农业大学江浦农场种猪场 甘信德 ～ 一 ‘ … … 一 … … ～ 、 ． ～ 一 一 一 ， 一 ～ … ， … ～ ～ 一 ～ 一 … … … ～ 一 一 一 … 一 ／ 一 一… ， ， 【摘要 】~ !g2-5mm的卵泡中抽取卵母细胞，用含有Fcs，BsA一『v，PMSG，HcG的TcM—l99液 和KRB修正液于37—39℃，5~CO：，5 O2~90 N2的湿润环境中成熟培养和体外受精。实验结果表明：培养40小 时后 ·4组卵丘细胞的扩展率分别为82．96％、89．76 、89．54 、85．57 ，组间差异不显著 (PO．05)。第一极 体放出率分别为l6．90 ．6．45 、13．64 、18．46 ，第2组明显低于其他各组，但不显著(P0．05)。用体外获 能的精子授精，卵裂率分别为25．93 ，18．18 ，31．O3 ，27．O3％；授精后29、30小时出现2一细胞，44~45小 时出现4一细胞，56小时出现8--细胞。 关键词：猪卵巢卵母细胞，成熟培养，体外受精。 哺乳动物的受精是一个在母体生殖道内完成的复 1 材料和方法 杂的生理过程，要在体内研究受精机理和胚胎早期发 1．1培养液和培养条件 育中分子生物学变化，受到许多限制。体外受精技术 本试验用的培养液为 TCM一199液和 KRB修正 的发展，为受精生物学和发育生物学的研究提供了体 液。卵喜细胞成熟培养液为：TCM--199粉(Sigma) 外操作和现察曲条件。这项技术不仅对探索受精的奥 0．99g，丙酮睃钠0．01g，碳酸氢钠0．1OgO．13g，Hepes 秘具有重要理论意义，而且征临床医学和畜牧业上也 0．238g，三蒸水1O0ml，PH7．4，胎牛血清 (FCS) 有广泛的应用前景。更是建立即发展胚胎岸的重要手 (南京卫岗血清厂) 1％，牛血清 白蛋白第五 部 分 段，为生物高技术提供大量的卵源。 (BSA—V)(Sigma)4．6rag／ml，孕马血清促性腺 4 诃 论 高梁糠的2．5倍，可以认为主要是植酸磷的作用使米糠 Jiang(1986)在大 饲粮中添加纤维素，使铜吸 组脾畦 (表 5)中的锌 、铁、钾、钠、镁、磷的含量 收率降低，并使肝脏和肾脏铜含量减少。Lindeman 显著低于高梁糠组。 等 (1986)韵试验表明，猪饲粮中添加花生壳使锰的 Coiling等人 (1979)用猪的试验表明，饲粮中小 吸收率也明显降低。Thompson和Weber (1981)用 麦麸水平升高使磷的吸收率下降，Thowpson和We’ 雏鸡的试验发现，在饲浪中添加米糠，使胫骨锰含量 ber在雏鸡 (公母各半)饲粮中添加米糠 (6％粗纤 显著降低。本试验结果与前人的发现基本相似，纤维 维)，饲喂4周，经组织分析发现，胫骨锌浓度显著低 素使脾脏含铜量、小麦麸与米糠使胰畦含锰量显著降 于对照组，而本试验结果是小麦麸使肝脏磷含量显著 低 。 升高，米糠使肝脏中锌和铁含量显著升高或许是某些 从本试硷结果可见，某一种纤维影响集一种元素