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真菌感染的实验室检查 淮安市第一人民医院 郑绍同 （一）概述 （二）真菌的侵袭性感染 （三）真菌感染的血清学检查 （四）真菌的药敏试验 一、概 念 真菌(fungus)：真核细胞型微生物 生存方式：腐生 or 寄生 繁殖方式：有性 or 无性 生长缓慢 分布广泛、种类繁多、数量大 多数有益：如酿酒、发酵、 生产抗生素等 少数有害：人类及动、植物疾病。 医学（病原）真菌400种， 常见的有50-100种 真菌症明显上升趋势： 1.?滥用抗生素引起菌群失调 2.用激素、免疫抑制剂、抗癌药物 和HIV感染引起的免疫功能下降 等原因 形态与结构 形态：多种多样,有核结构和细胞器。 按形态分类： (一) 单细胞真菌 (二) 多细胞真菌 （三）双相性真菌 单细胞真菌 形态：圆形或椭圆形，如酵母型和类酵母 型真菌。 （1）酵母型真菌 菌丝：无。 繁殖方式：从母细胞芽生 菌落：与细菌相似 （2）类酵母型真菌 菌丝：假菌丝 (pseudohypha) 假菌丝：长的芽体可伸进培养基内 菌落：与酵母型相似，由假菌丝联结成假菌丝体，称为类酵母型菌落 多细胞真菌 亦称霉菌 由菌丝和孢子两部分组成 1.菌丝 (hypha) 2.孢子 (spore) 孢子 (spore) 孢子是生殖结构，由生殖菌丝产生。 是鉴定和分类的依据。 (1) 无性孢子 (2) 有性孢子 分生孢子 二相性真菌 环境（如营养、温度、氧气等）的改变，有些真菌的孢子与菌丝两种形态可以互变，这类真菌称为二相性真菌（dimorphic fungus），如球孢子菌、组织胞浆菌及芽生菌。 真菌的培养特性 真菌的营养要求不高 常用沙保弱培养基 (Sabouraud′s medium)：蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和琼脂。 温度：22～28℃，但某些深部感染的 真菌为37℃。 pH：4.0～6.0 生长速度:较慢 在沙氏培养基上三种菌落 1.酵母型菌落 ：菌落柔软、光滑、湿润。镜下可见单细胞性的芽生孢子，无菌丝。隐球菌菌落 2.类酵母型菌落（酵母样菌落） ：和酵母型菌落相似， 镜下可见假菌丝。白色念珠菌菌落 3.丝状型菌落 ：由多细胞菌丝体组成的絮状菌落（一部分向空中生长，并形成孢子）。丝状真菌或霉菌菌落。 (菌落较大) 真菌菌落类型 二、侵袭性真菌感染 Invasive fungal infection,IFI 侵袭性真菌感染变得越来越常见 发病率增加：易感人群增加 骨髓和实体器官移植 肿瘤化疗 侵袭性技术如各种留置导管 肠外应用 广谱抗生素；糖皮质激素 支持技术使原来致死性疾病或早产儿存活 HIV/AIDS流行 糖尿病。。。。 检测或诊断技术提高 肺真菌感染：CT，支气管镜与肺活检 血清抗原，PCR… 增加的感染主要是条件致病真菌 致病性深部真菌 组织胞浆菌 球孢子菌 副球孢子菌 皮炎芽生菌 孢子丝菌 条件致病性真菌 隐球菌 念珠菌 曲霉菌 毛霉菌 肺孢子菌 不同部位的常见感染真菌 肺：念珠菌、曲菌、隐球菌、毛霉菌、组织胞浆菌、球孢子菌 中枢：念珠菌、隐球菌、曲菌、球孢子 消化：念珠菌 泌尿生殖：念珠菌、芽生菌。 心血管：念珠菌、曲菌、毛霉菌 眼、耳、鼻：念珠菌、曲菌、毛霉菌、镰刀菌。 血管内导管：真菌占14% 导尿管：真菌占22.4% 最常见的致病真菌为念珠菌和曲霉 念珠菌：最常见为白色念珠菌(50-60%)，其次为克柔、光滑、热带、葡萄牙和近平滑 曲霉菌：最常见为烟曲霉，其次为黄曲霉、土曲霉和黑曲霉 肺部真菌感染的诊断项目 临床表现 主要指标：晕轮征、新月征、空洞 次要指标：咳嗽、胸痛、咯血、呼吸困难、胸膜摩擦音、新的肺部浸润但不够主要指标 组织病理 微生物学 涂片与培养 抗原检测：半乳糖甘露聚糖（GM）是真菌细胞壁上的多聚抗原；1-3-β-D-葡聚糖（BG）也是一种真菌抗原成分；隐球菌荚膜抗原（血清） 基因检测：PCR 如何确定肺部念珠菌病？ 三、深部真菌感染的血清学检查 1、半乳甘露聚糖抗原 半乳甘露聚糖（GM）是曲霉菌细胞壁上的多糖抗原,主要用于诊断、监测曲霉菌及青霉菌属真菌的感染。 其诊断侵袭性曲霉病的敏感性为29- 100%,特异性可超过90%。 可用于尿液、脑脊液等其他标本检测。 2、1-3-β-D-葡聚糖 1-3-β-D-葡聚糖(BG)广泛存在于除接合菌、隐球菌外的真菌细胞壁中可作为深部真菌感染