小麦抗源A552抗叶锈病基因遗传和初步定位.pdf

小麦抗源A552抗叶锈病基因遗传和初步定位 2.4.2 基因定位22 定位群体22 DNA提取22 琼脂糖凝胶电泳检测提取的DNA质量23 A552的抗叶锈基因的SSR-PCR 扩增24 .1 SSR引物的准备24 .2 SSR-PCR反应程序24 A552的抗叶锈基因的RAPD-PCR 扩增24 .1 RAPD 引物的准备24 .2 RAPD-PCR 扩增程序24 扩增产物的检测25 .1琼脂糖凝胶电泳25 .2非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳25 染色25 拍照26 2.4.3 抗病性鉴定26 2.4.4 F 代群体纯和性鉴定2 27 BSA 2.4.5 混合分组分析法( ) 27 2.4.6 抗病基因间遗传距离的计算27 第三章 结果与分析30 3.1亲本及其杂交组合的部分特征特性30 3.2 小麦基因组DNA的质量30 3.3遗传分析31 3.3.1 小麦抗源A552杂交F ,F ,BC 代群体遗传抗病性鉴定结果31 1 2 1 A552 F 3.3.2 小麦抗源 杂交 代群体遗传分析 31 2 3.4 小麦A552抗叶锈病基因的分子标记32 3.4.1 多态性引物筛选32 3.4.2 遗传连锁性分析34 F 亲本间出现多态性引物在 代群体中的扩增 34 2 F BC 与目标基因连锁的标记在 代群体及 中的扩增 34 2 1 引物Xgwm533.2在抗感池中的扩增36 3.4.3 遗传距离37 2 小麦抗源A552抗叶锈病基因遗传和初步定位 3.4.4 遗传连锁图37 第四章 结论与讨论38 4.1 结论38 4.2 讨论38 4.2.1 小麦抗叶锈基因LrA552的应用价值38 4.2.2 选择体系的构建在基因定位中的作用讨论39 4.2.3 遗传分析在基因定位中的作用讨论40 4.2.4 分子标记的讨论41 分子标记技术的选择41 A552抗叶锈基因定位中标记筛选方法42 LrA552基因的SSR分子标记42 4.2.5SSR标记操作中应注意的问题45 非目的条带问题45 影响SSR检测结果的因素浅析45 4.2.6 下一步的研究45 对A552抗叶锈基因进一步的明确45 精细定位46 测序、图位克隆46 致 谢47 参 考 文 献48 附 录53