自来水中细菌总数测定.docVIP

自来水中细菌总数的测定 姓名:樊婧婧??????指导教师：陈燕飞 （太原师范学院??生物系111班??学号?2011131139） 摘 要 关键 引 言 水是生命之源，人的生存离不开水环境，水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。℃培养24h不得大于100个。细菌总数是指1mL℃经24h培养后，所生长的菌落数。本实验只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数。 水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。通过此方法我们能够计算出水中的细菌总数，从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染。℃培养48h小于3个。每升饮用水的水源中，总大肠菌群不得超过1000个。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。除采用平板计数技术测定水中细菌总数外，现在已有许多种快速、简便的微生物检测仪或试剂纸等也用来测定水中细菌总数。［4］ 1材料与方法 1.1 时间地点 1.1.1 实验时间 2013年月日1.2 材料、试剂与仪器 1.2.1 实验材料 自来水 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 1mol/LNaOH 1mol/LHCl水 高压蒸气灭菌锅培养皿 天平 pH试纸（pH5.5-9.0） 量筒 玻璃棒 电热炉 牛角匙1.3 实验方法 1.3.1 灭菌 (1)首先将内锅层取出,再向外锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。 ()放回内锅层,并的培养皿、三角烧、。 ()加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺旋，使螺旋松紧一致，勿使漏气。 ()用电炉加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸气压力增加而逐渐上升。当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。本实验用0.1MPa,121℃,20min灭菌。 ()灭菌时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至“0”时打开排气阀，旋松螺旋，打开盖子，取出灭菌物品。 1..2 水样的采取 放开水龙头使水流5min后，用已灭菌的三角烧瓶接取水样，以待分析。 1..3 制备牛肉膏蛋白胨培养基 1.3.3.1称量 按培养基配方依次准确的称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻璃棒挑取，放在称量纸上，称量后直接放入水中，稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。 在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻璃棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将称好的琼脂放入已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。 在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH，直至pH达7.6。反之，用1mol/L HCl进行调节。 1..4 细菌总数测定 1.3.4.1灭菌管吸取1mL水样，注入其中一套灭菌的培养皿中。共做个平皿。 分别倾注约15mL已溶化并冷却到45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基，并立即在桌上作平面旋摇，使自来水和培养基混匀。 另取一空的灭菌培养皿，倾注肉膏蛋白胨琼脂培养基15mL，作空白对照。 待培养基凝固后，倒置于37℃温箱中，培养24h，进行菌落计数。 个平板的平均菌落数即为1mL自来水的细菌总数。 .1 菌落照片 2.2 实验数据 2.2.1 表 自来水中菌落数表实验数据平板序号 1 菌落数目（个） .2.2 菌落记数方法 （1）先计算相同稀释度的平均菌落数，若其中一个平板有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。（）首先选择平均菌落数在30～300之间的，则只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的菌落总数。 （）若有两个稀释度的平均菌落数均30～300之间，则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则取其中较小的菌落总数（）若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。 （）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。 （）若所有稀释度的平均菌落数均不