HIV抗体检测技术.pptVIP

（3）快速检测（RT）及其它检测试验 优点:试验简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在10～30分钟内得出结果。 缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保存。 （1）明胶颗粒凝集试验（PA） 将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。 快速诊断试剂 PA法原理 PA法操作步骤 PA法 PA法 （2）斑点EIA和斑点免疫胶体金（或胶体硒） 以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原点状固定在膜上,加血清样品。 斑点EIA法用酶标记抗体，以后步骤同ELISA。 斑点免疫胶体金（或胶体硒）用红色的胶体金（或胶体硒）A蛋白标记，用渗滤法作为洗涤方法。 阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10 min以内，使用抗原量少。 快速诊断试剂 金标诊断试验原理 快速诊断试验 （3）免疫层析试验(金标法、硒标法) 以硝酸纤维膜为载体。 加样区：预包被胶体金-抗原/胶体金-protein A结合物 测试区（T）：固定有重组HIV抗原， 质控区：抗HIV单克隆抗体/抗-protein A抗体 快速诊断试剂 全血样品 加50ul样品于样品垫中 手指血方法 静脉血方法 加一滴缓冲液 15分钟内读取结果 硒标法操作步骤 病人条 质控条 快速诊断试验 优点:试验简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在10～30分钟内得出结果。 缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保存。 注意：一定要将试剂平衡至室温 快速诊断试剂 HIV抗体确认试验 确认试验的试剂： 必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。 确认试验方法： 免疫印迹试验(WB) 条带免疫试验(LIATEK HIVⅢ) 放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA) 国内常用的确认试验方法是WB。 HIV抗体确认实验结果 a 强阳性对照（HIV-1和HIV-2） b弱阳性对照（HIV-1） c阴性对照 d典型的HIV-2血清阳性反应 a b c d gp160 gp120 p66 p55 p51 gp41 p39 p31 P24 p17 血清对照 HIV-2特异带 筛查试验阳性反应样品 HIV抗体确证检测流程图 结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反应， 则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进 展，但不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进展或呈阴性反应 则报告阴性；满足HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准 可视情况决定是否继续随访。 确证试剂 根据具体情况进一步 检测HIV-2 报告阴性 出现HIV-2指示条带 阴性反应 不确定反应 报告HIV-1 阳性 HIV-1 阳性反应 HIV抗体确认试验不确定结果 P24 ：非特异性反应（孕妇，正常人） Gp160：非特异性反应，感染早期，感染晚期 Gp160，gp120：非特异性反应，感染早期，感染晚期 Gp160，p24：非特异性反应，感染早期，感染晚期 Gp160，gp120，p24：感染早期，感染晚期 污染？ HIV抗体检测的要点 1、根据目的选择检测方法及检测策略。 2、严格遵守实验室SOP。 3、筛查试验阳性，须作确证实验。 4、筛查试验阴性，不应做确证实验。 5、筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。 HIV 抗体检测不能用来诊断 ： HIV 急性感染 新生儿HIV 感染 艾滋病病毒感染产妇所生儿童 阳性 阴性 用另一种不同原理或不同厂家 生产的筛查试剂再次检测 12个月进行HIV抗体筛查试验 确证试验 18个月时再进行HIV抗体筛查试验 报告HIV抗体检测结果阴性 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程 阳性 阴性 阴性 阳性 用另一种不同原理或不同厂 家生产的筛查试剂再次检测 阴性 阴性 阳性 报告HIV抗体检测结果阳性 提供咨询，继续 随访，4周后再次 进行确证试验 不确定 阳性 婴幼儿HIV感染的抗体检测 适用范围： HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现HIV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。 婴儿应于12个月进行HIV抗体检测，结果阴性则排除感染，纳入正常儿童保健；阳