721型分光度计使用及波长的检测与校正.docVIP

在721型分光光度计使用及波长的检测与校正 目 标：1.掌握比色分析的基本原理 2.规范使用721型分光光度计及利用镨钕滤光片法对其波长的检测 实验用品：721型分光光度计、镨钕滤光片、5%CuSO4液、纱布、比色杯等 内 容： 721型分光光度计的使用 【原理】 利用被测物的有色溶液对某一特定波长的光谱具有选择性吸收的特性，将吸收的光谱按不同强度转变相应的电能，再将电量的变化用检流计显示出来，将显示的电量以光量强度（D或A）计算，根据朗伯-比尔定理，即D=KCL，即吸光度与溶液的浓度与厚度的乘积成正比关系。 【操作步骤】 接通电源→选择波长→粗调透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%” (关盖)→预温20min→放入被测液→精确调节透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%” (关盖)→测定，读取各管吸光度→收场（关电源、罩仪器罩、登记、清洗比色杯和纱布等） 【注意事项】 仪器需防震、防潮、避光。 比色时，手拿比色杯的毛面，液体倒杯高的2/3或4/5，比色杯不能用硬毛刷刷洗，也不能用高温烘烤。 721型分光光度计波长的检测与校正（镨汝滤光片法） 在比色槽的光路上放一张小白纸，调节波长至580nm。 旋动光量T100%的旋钮至最大，在小白纸上应看到桔黄色的光斑。 若光斑不是橘黄色，左右旋转波长调节旋钮使之出现橘黄色的光斑，粗略判断波长偏离的程度，选择检测的起始波长。 调节波长至起始波长，用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 将镨汝滤光片推入光路中，记录T或A值，退出镨汝滤光片。 调节波长至另一值，用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 再将镨汝滤光片推入光路中，记录T或A值，退出镨汝滤光片 如此反复测定直至T值为最小或A值为最大，记录此点的指示波长。 将A值最大时的波长减去镨汝滤光片最大的吸收波长529nm，即得被校比色计的波长误差。 如波长精度超出允许误差.（360~600nm≤3nm;600~700≤5nm;700~800≤8nm），打开分光光度计左侧调节窗口盖板，用螺丝刀试调波长的调节杆。具体位置详见仪器使用说明书。 试调波长的调节杆后，再按步骤3~8操作，直至分光光度计的波长精度误差在其允许范围内即可。