大孔吸附树脂分离纯化枫香槲寄生总黄酮的工艺研究论文.docVIP

　　大孔吸附树脂分离纯化枫香槲寄生总黄酮的工艺研究论文 钟世顺 许雄伟 曾德贵 李健新 【摘要】 目的研究大孔吸附树脂富集纯化枫香槲寄生总黄酮的最佳工艺参数。方法以枫香槲寄生总黄酮吸附量为指标，通过正交实验考察确定了该树脂分离纯化总黄酮的工艺条件。结果AB-8型树脂对枫香槲寄生总黄酮有良好的吸附分离性能，其吸附分离工艺条件为：上样浓度为2.55 mg·ml-1，上样液pH为3，吸附流速为3 BV·h-1，洗脱剂为60%乙醇。结论 AB-8型大孔吸附树脂在所确立的工艺条件下，纯化枫香槲寄生总黄酮效果良好，总黄酮纯度可达60%左右。 【关键词】 枫香槲寄生 总黄酮 大孔吸附树脂 Abstract：ObjectiveTo explore the optimal condition for purification of total flavonoids from Viscum liquiddambaricolum Hayata.acroporous resin. MethodsThe process technology for purification of total flavonoids acroporous resin acroporous resin oum absorption and elution ability. The optimum absorption conditions ple concentration 2.55 mg·ml-1,.freelacroporous resin can be used to purify total flavonoids from Viscum liquiddambaricolum, the purity of total flavonoids is about 60%. Key liquiddambaricolum Hayata; Total flavonoids; Macroporous resin 枫香槲寄生Viscum liquiddambaricolum Hayata. 系桑寄生科槲寄生属植物.freel liquiddambaricolum Hayata. ；大孔树脂（型号分别为AB-8，DA-201，D-101，均为净品级，天津海光化工有限公司）；NaNO2，Al(NO3)3，NaOH等试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 含量测定 2.1.1 标准曲线的制备精密称取经五氧化二磷干燥恒重的芦丁对照品10 mg，用60%乙醇溶解并定容至100 ml，摇匀备用。精密吸取对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml于10 ml容量瓶中，加入60%乙醇至6 ml，加入5% NaNO2 0.3 ml，摇匀，再加入10% Al(NO3)3 0.3 ml，摇匀，放置5 min后加入4%NaOH 3 ml,用60%乙醇定容至刻度，混匀后放置5 min；同法以60%乙醇加随行试剂作空白在510 nm处测定吸光度［4］。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：A=11.162 C-0.005 6，r=0.999 8(n=6)，线性范围为10～50 μg·ml-1。 2.1.2 枫香槲寄生药材总黄酮的含量测定精密称取枫香槲寄生粗粉5.0 g，分别加入60%乙醇40 ml，浸泡0.5 h后置水浴中回流提取2次，2 h/次，提取液滤过、合并，60%乙醇定容至100 ml。精密吸取提取液1.0 ml置于10ml刻度试管中，按标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算出枫香槲寄生中总黄酮含量为（10.75±0.47）mg·g-1 (n=5)。 2.2 大孔吸附树脂纯化工艺考察 2.2.1 大孔吸附树脂的预处理 因采用净品级树脂，采用乙醇湿法装柱，用乙醇流动清洗，不时检查流出液至与水混合（1∶5）不呈白色浑浊为止，然后以大量纯化水洗去乙醇至流出液无醇味。 2.2.2 上柱液的制备 称取枫香槲寄生粗粉，分别加入8倍量60%乙醇回流提取2次，2 h/次，提取液滤过、合并，水浴蒸干至无醇味，加入适量纯化水溶解定容至一定体积，即得上柱液。 2.2.3 静态吸附量考察 分别精密称取预处理过的AB-8，DA-201，D-101树脂各1 g（湿重）置于100 ml锥形瓶中，分别加入10 ml槲寄生提取液（含生药量250 mg·ml-1），室温下置摇床中，以50 r/min下振摇24 h，使之充分吸附，取上清液测定其中总黄酮含量，计算各树脂的静态吸附量。结果见表1。 静态吸附量（mg/g）=(上样液浓度-上清液浓度)×上样液体积树脂质量 2.2.4 静态解吸量考察 取“2.2.3”项下已充分吸附过的树脂，分别加入60%乙醇30 ml，室温下置摇床中，以