- 1、本文档共41页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
人教版2017年高中生物第1部分专题5课题3血红蛋白的提取和分离选修一课件
蛋白质在凝胶色谱柱中行进的速度和途径主要与蛋白质分子的大小相关;在电场中的运动速度和方向除了与蛋白质的分子大小相关外,蛋白质的带电性质、电量、形状都影响其在电场中的运动方向和运动速度。 [例2] 凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果,目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。据图回答问题: (1)a、b均为蛋白质分子,其中先从层析柱中 洗脱出来的是__________,原因是__________。 (2)自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部 d位置相当于多孔板的结构可由________________________替代。 (3)装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存 在,原因是_________________________________。 (4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体________(填“相同”或“不同”),洗脱时,对洗脱液的流速要求是________________________。 (5)若选用SephadexG-75,则“G”表示________,75表示________。 [解析] 本题主要考查凝胶色谱法的原理和操作注意事项,可按以下思路进行分析作答。 (1)原理:由于不同蛋白质其相对分子质量不同,相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部通道,只能在凝胶外部移动,路程短,速度快,易洗脱;相对分子质量较小的则进入凝胶内部通道,路程长,速度慢。 (2)注意事项: ①凝胶色谱柱的制作:底部橡皮塞的凹穴上覆盖尼龙网和100目的尼龙纱,相当于多孔板。 ②凝胶色谱柱的装填:装填时尽量紧密,不得有气泡存在,因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。 ③装填材料即交联葡聚糖凝胶的特点及表示方法。 ④样品的加入和洗脱:洗脱时和浸泡凝胶所用液体均是物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液,洗脱时,对洗脱液的流速要求保持稳定。 [答案] (1)a a相对分子质量较大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快 (2)尼龙网和尼龙纱 (3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果 (4)相同 保持稳定 (5)凝胶的交联程度,膨胀程度及分离范围 凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g (1)实验结果如果不理想,需要重做时,必须进行凝胶色谱柱的重新装填。一般情况下,凝胶不会与其他溶质发生任何作用,因此,在一次分离以后,稍加平衡就可以进行下一次的操作。平衡时,需用3倍柱体积的洗脱液过柱。 (2)如果实验操作中有一些杂质污染了色谱柱,可以用物质的量浓度为0.2 mol/L的氢氧化钠和物质的量浓度为0.5 mol/L的氯化钠混合液处理交联葡聚糖凝胶。 (3)如果凝胶长期不用,可以加入抑菌剂低温保存,使用时再进行充分的平衡。 点击进入 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第 1 部分 专 题 5 课题 3 理解教材新知 把握热点考向 应用创新演练 知识点一 知识点二 考向一 考向二 1.透析法分离蛋白质的目的是除去小分子 杂质。 2.利用凝胶色谱法分离蛋白质时,相对 分子质量大的先洗脱出来,相对分子 质量小的后洗脱出来。 3.在电泳中,待分离样品中分子带电性质的差异以及分 子本身的大小、形状都会影响分子的迁移速度。 4.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子 的大小。 5.蛋白质提取和分离的一般步骤是:样品处理与粗分 离、纯化和纯度鉴定。 6.在对蛋白质进行纯度鉴定时,使用最多的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。 [自读教材·夯基础] 形状和大小 电荷 亲和力 1.蛋白质分离的理论依据 2.分离的方法 (1)凝胶色谱法:根据
您可能关注的文档
- 人体内环境的稳态及其事例校.ppt
- 人体内环境与稳态2016届高三生物一轮复习.ppt
- 人体生理功能的调节2013-5.ppt
- 产科促进母乳喂养何凤权.ppt
- 人体生理学06血液循环1.ppt
- 人体生理学03中枢神经系统01.ppt
- 人体生命活动的神经调节北师大版.ppt
- 人体生理学06血液循环2.ppt
- 人体的消化、呼吸、循环、泌尿系统高中补充资料.ppt
- 人体解剖学名校精品课件——周围神经系统三.ppt
- (高清版)DB42∕T 2006.4-2023 《劳动用工保障 第4部分:农民工工资信息化监管平台建设与管理规范》.pdf
- (高清版)DB42∕T 1895-2022 《人工影响天气火箭发射系统年检技术规范》.pdf
- (高清版)DB42∕T 1781-2021 《设施栽培高温闷棚技术规程》.pdf
- (高清版)DB42∕T 1788.2-2022 《化学农药减施增效技术规范 第2部分:梨园》.pdf
- (高清版)DB42∕T 1921.5-2022 《湖北省工业行业用水定额 第5部分:水泥》.pdf
- (高清版)DB42∕T 1931-2022 《体育健身俱乐部的开放条件与技术要求》.pdf
- (高清版)DB42∕T 1952-2023 《城市隧道监控系统技术规范》.pdf
- (高清版)DB42∕T 1980-2023 《鹅掌楸属无性繁殖技术规程》.pdf
- (高清版)DB42∕T 2001-2023 《用户侧电化学储能系统设计技术导则》.pdf
- (高清版)DB42∕T 2010-2023 《生态地质调查规范》.pdf
最近下载
- 上市公司数据资产入表案例分析与启示.pptx VIP
- 《工贸企业有限空间作业安全规定》(应急管理部13号令)培训.pptx VIP
- 应收账款账期到期提醒台账模板.xlsx VIP
- 《中华人民共和国民用航空法》培训解读课件.pptx VIP
- 02《红楼梦》整本书阅读回目自测(21-40回)(分层练习)-2024-2025学年高一语文同步精品讲练(统编版必修下册)解析版.docx VIP
- 防护棚安全通道搭设施工方案1.docx VIP
- 街区市集规划案.pptx VIP
- 污水零直排运维台账.docx VIP
- 2025年重庆市永川区社区工作者招聘考试笔试试题(含答案).pdf
- 安全生产治本攻坚三年行动PPT课件.pptx VIP
文档评论(0)