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血细胞分析仪使用的室内质量控制的要求
血细胞分析仪使用的室内质量控制的要求
分析前质量控制
操作人员上岗前必须进行专业培训 上岗前应仔细阅读仪器说明书或接受专业人员培训,要求仪器的原理、操作规程、使用注意事项、细胞分布直方图、异常报警的含义、引起实验误差的因素及对仪器的维护有充分的了解,掌握用ICSH推荐的标准方法校正仪器的调试,具有高度的责任心和事业心,否则不能上机操作。
仪器安装必须符合要求条件 血细胞分析仪系精密电子仪器,由于测量电压低,易受各种干扰不。为了确保仪器的正常工作,必须将仪器安放在一个远离电磁干扰源、热源的位置,防止仪器的实验台要稳固,工作环境要清洁,要在防潮、防阳光直射、通风好的条件中。室内温度应在15~25OC之间,相对湿度80%。为了安全和抗干扰,仪器应用电子闻压器并妥善接地。
做好仪器的维护保养工作
日保养程序:
日常开机:开机后用20%次氯酸钠冲洗一次,然后做空白一次。
检查试剂量,根据需要更换新试剂
检查打印机。
执行背景值计数。
执行质量控制程序。
日常关机:下午下班前关机,关机后以稀释管道吸20%次氯酸4ml。
视需要,清除或更换废水容器。
每周保养程序:用20%次氯酸纳洗 次。
每月保养程序:用浓次氯酸纳洗杯子。
每半年一次的保养:注意打印机的清洁保养。根据情况做不定期保养。
4. 仪器校正:仪器j校正方法定值后的新鲜血液或其它人工微粒制品校正仪器的各项参数。在没有标准定值血时,不少于半年进行手工校正(参考质控图,如果异常或失控时进行校正。)
HCG校正(氰化高铁血红蛋白法)
1.721型比色计的校正:去HiCN标准液放在1cm比色杯中,从500~580nm分几个波段测量其A值,如果最大吸收峰在540nm,证明仪器波长准确,否则检查721比色计的有关部分;将四种50g/L,100g/L,150g/L,200g/L的HiCN标准液分别用721比色计比色,然后根据公式求出该仪器的校正系数(K值);进一步观察线形,各点连线应呈直线,如有个别点在直线外,做图时应使直线通过尽量多的点,不在直线上的点其吸光度与所代表的浓度在直线上的吸光度比较,如两者之差在5%以内,则可认为仪器符合线形要求。
2.HiCN测定试剂要求:
为淡黄色透明液体,如有变混、变绿现象,即不能用。
PH底于7.0时进行调整,否则与Hb混合引起混浊,同时Hi不易与CN结合,而KCN容易分解,以HCN形式散失。
试剂应放在棕色玻璃瓶中,冰箱保存,但不能结冰。
3.测定一份新鲜全血标本10次去均值,以次均值作为校正仪器的标准值。
WBC、RBC、PLT校正(目测计数法)
标本稀释:取校正后的吸血管及试剂吸管,加入血液后应与试剂充分混匀,放置15分钟后充液计数。充满避免摇出过多气泡。
加盖片方式:采用“推式”盖片法。
正规操作:做到采血量要准,吸血要快、放血要慢,如取末梢血要防止用力挤压。(充液过多、继续、产生气泡或充液后盖片移动,要重新操作。)
系统误差的质控:系统误差来源于血红蛋白吸管、计数池及盖玻片是否标准化。血红蛋白吸管要用水银法检查校正,误差+1%,计数池的深度可用卡尺法测定,误差应+2%,计数室面积可用测微尺测定,每个格边长误差应+1%,盖玻片应为专用血细胞计数盖片(24㎜×20㎜×0.6㎜),要求两面平整、光滑,高倍镜检无裂隙,两面光单平面误差应+0.002㎜。
由有经验的专业人员计数一份新鲜全血标本10次取均值,以此作为校正仪器的标准值。
MCV校正
温氏管为110㎜×2.5~3㎜平底厚壁玻管,抗凝剂为EDTA·K23.5mg可抗凝2ml静脉血,水平离心机以3000r/min离心30min。
用温氏管法测定10次新鲜全血标本的HCT,以HCT/RBC为MCV的标准值,以次均值作为校正仪器的标准值。
校正后的AC 920EO血细胞分析仪即为标准仪器,以次仪器校正特康2000A。两台仪器每月对照一次,以保证其一致性。
4.标本的采集和存放
要求抗凝的静脉血(抗凝剂为EDTA·K2,一般3~5mg可阻止2ml血液凝固),不用末梢血穿刺采血(不包括3岁以下儿童)。采血容器要保证清洁和保证操作者安全。标本应在2小时内测定。抗凝血在室温下,WBC、RBC、PLT可稳定24小时,WBC分类可稳定6—8小时,HGB可稳定数日,但2小时后粒细胞形态即有变化。
分析中质量控制
试剂的合理使用:原则上应使用原仪器的配套试剂,自配试剂符合条件经科领导同意也可使用。
自配试剂使用的条件:
自配试剂在成分和剂量上与配套试剂可能不尽相同,但同一分血液标本在两种试剂体系中细胞产生的脉冲信号应是相同的,与血细胞分类直方图应是相符的,细胞分类结果应一致,如达不到这一点,不能代替进口试剂。
在血细胞、血小板测试系统中,红细胞平均体积、血小板平均体
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