大肠埃希氏菌--培训课件.pptVIP

检样量的选择 注1：本表采用3个稀释度[0.1 g(mL)、0.01g(mL)和0.001 g(mL)]，每个稀释度接种3 管。 注2：表内所列检样量如改用1 g（mL）、0.1g(mL)和0.01 g(mL)时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.01 g(mL)、0.001 g(mL)、0.0001 g(mL)时，则表内数字应相应增高10倍，其余类推。 大肠埃希氏菌平板计数法（第二法） 制订依据 美国食品药品管理局（FDA）：Bacteriological Analytical Manual ，2002，Chapter 4：Enumeration of Escherichia coli and the Coliform Bacteria 基本原理 4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷，英文缩写MUG。是一种不产生荧光的底物。由于96%的大肠埃希氏菌都具有葡萄糖醛苷酸酶，能分解β-D葡萄糖醛苷，而使4-甲基伞形酮游离出来，在366 nm紫外光下产生蓝色荧光。观察到蓝色荧光即可认为是大肠埃希氏菌阳性。MUG对大肠埃希氏菌的生长繁殖既没有抑制作用也没有促进作用，对菌落形态也没有影响。 大肠埃希氏菌平板计数法程序 检样25g(mL)+225mL稀释液 均质10倍系列稀释 选择2~3个适宜稀释度的样液，接种VRBA-MUG平板 36℃±1℃ 18~24h 紫外光照射，计数发荧光菌