山葡萄转色期果皮cDNA文库的构建与分析.pdfVIP

Code：10225 University Code：S11162 Register Dissertationforthe ofMaster Degree Constructionand ofcDNA from Analysis Library Ht／samurensis skinsatVeraison grapevine Bo Candidate： Li Jun Supervisor： Prof．Wang Associate Supervisor：YangCheng—Jun Academic for： Master DegreeApplied Forestresource Speciality： plant DateofOralExamination：June201l Northeast University： ForestryUniversity l 摘要 摘要 葡萄是世界范围内重要的果树树种，也是栽培品种最多的物种之一。葡萄鲜果除鲜 食外，又可作为酿酒、制干、制汁等原料而具有极高的经济价值。山葡萄是我国重要的 野生果树资源，具有极强的抗寒性，是我国东北地区酿造葡萄酒的主要原料。转色期作 为非跃变型果实特有的一个生长阶段，是浆果在大小、硬度、色泽以及内部生理生化发 生剧烈变化的时期。为了获得大量山葡萄功能基因信息，并以此为基础筛选感兴趣的目 的基因，本文构建了山葡萄转色期果皮的cDNA文库，并进行了较高通量的EST测序 和生物信息学分析。主要的研究成果如下： kb--一2 DH5口中，构建了山葡萄转色期果皮eDNA文库。文库插入片段大小为0．5kb之 间，平均约为0．8 106 kb。原始文库滴度为1．12X pfu·mL～，扩增后的文库滴度为2．82 X109 pfu·mL～，重组率接近100％，表明所构建的cDNA文库质量高，完整性好。 2、从山葡萄转色期果皮eDNA文库中随机挑取1009个单克隆进行测序，去除载体 以及低质量序列后，共获得974条高质量序列，占全部测序量的96．53％。将其进行 列的72．90％。一致序列的有效长度分布在102 bp～1024bp，平均长度为431．35bp。 722条EST)与数据库中的已知基因具有高同源性。结合拟南芥功能基因分类标准，把 通过BlastX比对获得的功能描述基因(包括功能确定及推测功能的)分为10类，即能 7．46％、蛋白质合成相关基因(Protein 量代谢相关基因(Energy／M