粉纹夜蛾细胞系QB—Tn9-4s的克隆以及克隆株生物学特性的研究.pdfVIP

环 境 昆 虫 学报 口Z0厂 rfJn n￡。Z o啪Zogy，March2009，31(1)：35—40 ISSN1674 858 doi：10．3969／i．issn．1674一O858．2009．O1．005 粉纹夜蛾细胞系QB—TIl9-4s的 克隆以及克隆株生物学特性的研究 马 明，李长友，郑桂玲，李银花，李国勋 (青岛农业大学无脊椎动物细胞培养与细胞工程 中心，青岛 266l09) 摘要：对粉纹夜蛾nc叩z 细胞系QB—Tn94s进行细胞克隆，获得了8个细胞克隆株，分别命名为QB—Tn—A、 B、c、D、E、F、G和H。对基因组 DNA进行 RAPD—PcR鉴定，各细胞克隆株与原始细胞系具有相同的DNA扩增谱 带。各细胞克隆株在形态和生物学特性方面表现出一定的差异。克隆株QB—Tn—A、B、c、D和E以梭形细胞为主， 大约占细胞总数的60％ ～80％；F、G和H以棒状细胞为主，比例分别为4J4．5％、49．5％和80．0％。8个克隆株对 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV)均较敏感，感染率均在92％以上，平均每个细胞病毒多角体 (OBs)产量 在 78～ll0个之间，其中克隆株 QB—Tn—A多角体产量最高达 11O个 ，略高于BTl— B1-4和 QB—Tn9_4s，明显高于 sf_9细胞；克隆株QB—Tn—E、H、A和c的出芽性病毒 (BV)产量与原始细胞系 (3．37×10TcID ／mL)接近，而其它4 株均低于原始细胞系。 关键词：粉纹夜蛾；悬浮性细胞系；细胞克隆；AcMNPV；病毒产量 中图分类号：Q966 文献标识码：A 文章编号：1674 858(2o09)01_0035一o6 Cl0ning0f乃 ceU lineQB．Tn9_4sand characterizati0n 0f itscl0nes MAMing，LIChang-You，zHENCGui—Ling，LIYin—Hua，LIGuo-xun (ACenterf0rAdvancedInver— tebrateCellCultureandCellEngineering，QingdaoAgriculturaluniversity，Qingda0266l09，China) Abstract：Itiswellkn0wnthatthecharacteristicsam0ngce儿linesfrl0m embry0aredifflerent．Inthispa— per，wedescribedcloneandis0lati0n0fcultuI．ecel1f_r0ml0wpassage c fz0ncelllineQB一In94s andI℃p0rtedtheirgr0wthcharacteristicsandproduction0focclusionbodies(0Bs)．Eightcellcl0nes weI．esuccessfu1lyderiVedfImtheestablishedcell】ineanddesignatedQB—Tn-A，B，C，D，E，F，Gand H，respectiVely．RAPD—PCR analysisofthegen0micDNA 0ftheeightc10nesc0nnm edtheirgenetici— dentityasQB—Tn9_4s．rhemoI1)h0logyandbiol0gicaleharacterization0ftheceuclonesweredifferent frl0m eachother．ClonesQB—Tn—A，B，C，DandEc0nsist0fappr0ximately6O％ ～80％ spindle-shaped cells，cl0nesF，G andHwerem0stlymadeup0f44．5％ ，49．5％ and80．0％ comma—shapedcells，re— spectiVely．Eightcloneswerehighly suscept