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竞赛辅导专题8 胚胎工程 (二)胚胎体外培养 * 一、受精作用 是指成熟精子与卵细胞结合成受精卵(合子)的过程。 精卵识别—精子附着于卵膜—精卵质膜融合 卵细胞核 精子核 精卵质膜融合, 精子核进入卵 精卵核融合, 成为受精卵 精子 卵细胞 受精作用过程: 胚胎工程 胚胎发育过程(以蛙卵为例) 1、卵裂:指受精卵早期的细胞分裂。 细胞只分裂不生长,胚胎所含的细胞数量越来越多, 每个细胞体积越来越少。胚胎体积基本不变。 2细胞胚 4细胞胚 8细胞胚 桑椹胚 囊胚 受精卵 卵裂球含2~8个细胞时,其中每一个细胞都具有全能性 (有丝分裂) (胚胎的有机物的量越来越少,胚胎的DNA含量越来越多) 2、囊胚: 囊胚腔 外形 剖面图 滋养层: 发育成胚胎的附属结构 或胚外结构如胎盘。 内细胞团 (内细胞团细胞为胚胎干细胞) 未分化,具全能性 能分化出成体动物的所有组织和器官 原肠胚剖面图 原肠腔 外胚层 中胚层 内胚层 缩小的囊胚腔 3、原肠胚: 囊胚(胚泡)剖面图 囊胚的内细胞团细胞进一步增殖、分化,形成三个胚层。 原肠胚的细胞已经进行了细胞分化,全能性降低。 外胚层:发育为表皮及其附属结构、神经系统、感觉器官。 中胚层:发育为真皮、脊索、骨骼、肌肉、循环系统、排泄系统、生殖系统等 内胚层:发育为消化道上皮、消化腺(肝和胰)、呼吸道上皮、中耳、甲状腺、胸腺、膀胱的上皮组织。 胚胎工程有哪些技术? 一、体外受精和胚胎体外培养 二、胚胎移植 三、胚胎分割 四、胚胎干细胞 一、体外受精和胚胎体外培养 取雌性动物的卵细胞和雄性动物的精子, 使其在试管中受精。 1、概念: 2、步骤: (1)成熟精子的采集和获能; (2)卵母细胞的采集和培养; (3)获能精子和成熟卵细胞的受精; (一)体外受精 常用促性腺激素作于母体使其超数排卵 试管动物的生殖 方式为________。 有性生殖 1、概念 在人工创造的环境下对获取的早期胚胎进行体外培养。 2、培养液 水、无机盐、有机物、维生素、氨基酸、核苷酸、激素以及动物血清等。 3、现状 胚胎培养比组织、细胞培养要难。目前还无从受精卵到新生儿的全体外培养技术。 (培育不同时期胚胎需用不同成分培养液) 受精后形成的受精卵需经早期发育培养,才能完成植入或着床 通常胚胎移植的最适宜的时期是发育到8细胞以上的胚胎,如早期囊胚等。 采集良种母牛的卵母细胞 采集良种公牛精子 卵母细胞的体外培养 精子体外获能 体外受精 早期胚胎 (胚胎移植) 受体牛 子代良种牛 (超数排卵) (胚胎体外培养) 例如:试管牛培育流程 二、胚胎移植 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 获取早期胚胎 胚胎移植 妊娠检查 分娩(胚胎移植的犊牛) 概念:将良种家畜的早期胚胎分别移植到同期发情的代孕母的子宫里,通过代孕母妊娠产仔的技术。 意义: 可以充分发挥优 良雌性个体的繁殖潜力,缩短供体本身的 繁殖周期。 “借腹怀胎” 常用孕激素等 三、胚胎分割 借助显微操作技术将早期胚胎切割成几等份,再移植到代孕母的子宫中发育,产生同卵多仔后代。 分割方法: 机械法(切割针、切割刀) 酶处理卵裂球 囊胚 无性生殖 意义:加快良种畜的繁殖。 分割后的胚胎或细胞直接移植给受体,或在体外培养到囊胚阶段,再移植到受体内。 胚胎干细胞特点: 1)形态:体积小、细胞核大、核仁明显。 2)功能:具有发育的全能性,可分化为成年动物 体内所有的组织和器官。 胚胎干细胞(简称ES细胞),是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团分离出来的一类细胞。 四、胚胎干细胞 1、胚胎干细胞培养: 培养关键: 需要一种能促进胚胎干细胞的生长,但抑制其分化的一种培养体系。 培养过程: 5、加饲养层继续传代培养。 1、制备饲养层(胚胎成纤维细胞); 2、培养胚胎到内细胞团突出饲养层; 3、酶消化或机械剥离内细胞团; 4、用酶消化成单个细胞。 能分泌一些抑制细胞分化的物质 2、胚胎干细胞核移植: 将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中,经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 3、胚胎干细胞的主要用途: (1)基因敲除,获得移植器官。 (2)培育出人造组织器官, 用于器官移植。 (3)改良创造动物新品种。 相关考察 例:下列关于胚胎工程的叙述,错误的是 A.体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶 液中受精 B.受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植 C.早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都 需加入血清 D.试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养 和胚胎移植技术 B 例: 下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。 (1)从良种母牛采集的卵母细胞
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