香蕉凝集素基因双启动子表达.pdfVIP

维普资讯 果 树 学 报 2008，25(3)：422～425 Joum alofFruitScience 香蕉凝集素基因双启动子表达 张建斌，赵 静，黎耀平，金志强，徐碧玉 (中国热带农业科学院热带生物技术研究所 ．海 口571101) 摘 要 ：为 了获得香蕉果实特异表达的强启动子 ，利用PCR方法将 2个凝集素 (BanLec)基因启动子串联在一起 ，置 换植物表达载体pBll21上 的35S启动子 ，构建 BanLec基 因双启动子携带 gus植物表达载体 pBIL3，用基因枪转化 香蕉 叶片 、根系和果实薄片 ，瞬时表达结果显示 BanLec基因串连的双启动子依然表现为果实特异性表达 ，而且表达 量明显高于 BanLec基 因单启动子及 35S启动子 ，证 明该串连的双启动子是一个在香蕉果实中特异表达且表达量较 高的强启动子 关键词 ：香蕉 ；凝集素基因；双启动子 ：果实特异表达 中图分类号：$668．4 文献标识码 ：A 文章编号：1009—9980(2008)03-422—04 Activitycharacterizationofabananalectingenedoublepromoter ZHANGJian—bin，ZHAOJing，LIYao—ping，JINZhi—qiang，XUBi-yu (InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology，ChineseAcademyofTropicdAgriculturalSciences，Haikou，Hainan571101China) Abstract：Inordertoacquireanenhancedpromoterexpressedspecificallyinbananafruit，adoubleBanLecgenepromoter wereconstructedbyPCRmethod．The35SpromoterintheexpressionvectorpBI121wassubstitutedwiththedoublepromoter tOconstructanewplantexpressedvectorpBIL3，whichwasthenligatedwithgusgene．Bananaleaves，rootsandfruitsec— tionsweretransformedwiththisvector．Theresultindicatedthatthisdoublepromoterwasfruit—specificanditsexpression wasstrongerthansingleBanLecgenepromoterand35Spromoter． Keywords：Banana；BanLecgene；Doublepromoter；Furit—specificexpression 香蕉果实是利用转基 因方法生产重组药用蛋 异表达的启动子 ，其表达活性稍高于 35S启动子}lJ】， 白、肽或有价值的化合物的理想生物反应器}l1，研究 转化番茄研究也证实为果实特异高效表达启动子， 者们期望插入的抗原基因能够特异地在香蕉果实中 已获国家发明专利授权 (专利号：ZL2oo410092468．4)。 表达 ，从而使香蕉果实变成I=1服疫苗 。这就要求有 在此基础上，我们构建 了该启动子的串联表达载体 ， 果实组织特异性启动子。已报道的香蕉转基 因研究 通过gus瞬时表达研究其活性 ，期望能够获得香蕉 中用到的启动子有花椰菜花叶病毒 (CaMV)35S启 果实特异表达的强启动子 ，为香蕉果实作为植物生 动子2-【4]，玉米泛素蛋 白启动子 (Ubi)[5-63。水稻肌动蛋 物反应器，生产药用蛋白或者药用成分提供一个优 白启动